重组变构人TRAIL联合柔红霉素对白血病细胞诱导凋亡作用及其机制的研究论文.docVIP

　　重组变构人TRAIL联合柔红霉素对白血病细胞诱导凋亡作用及其机制的研究论文 张学军 温丽 王福旭 罗建民 潘崚 刘小军 杜行严 董作仁 杨世芳 【摘要】 为了研究重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（ rebinanat mutant human TRAIL, rmhTRAIL）单用及与柔红霉素（DNR）联合应用对白血病细胞株U937、K562的诱导凋亡作用及其机制，以正常人胚肺成纤维细胞株MRC-5作对照，采用MTT法检测体外培养的U937、K562白血病细胞株在rmhTRAIL单用和联合DNR作用下增殖的抑制效应；用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测DNR 处理前后白血病细胞TRAIL死亡受体和诱杀受体的mRNA表达水平。 结果表明：rmhTRAIL对白血病细胞株U937、K562有较明显的抑制增殖作用，DNR与TRAIL联合对抑制肿瘤细胞具有协同性，与各药单独使用比较均有显著差异（P 0.05）；经DNR作用后，U937、K562细胞的死亡受体DR4、DR5水平上调，而两种诱杀受体DcR1、DcR2表达未受影响。 结论：在体外rmhTRAIL单用或与DNR联用均能明显抑制白血病细胞增殖，rmhTRAIL与DNR对白血病细胞的杀伤有协同作用.freelhTRAIL；U937细胞；K562细胞；柔红霉素 bined Effect of Rebinant Mutant Human TRAIL and Daunorubicin in Inducing Apoptosis of Leukemia Cell and Its Mechanism AbstractThe aim of study t muctant human TRAIL (rmhTRAIL) ia cell lines and its mechanism. The fibroblasts (MRC-5) of normal-human embryonic lung hTRAIL and DNR or only TRAIL, the cytotoxic effect and the apoptosis rate in K562, U937 cells easured by MTT assay. The expression levels of TRAIL death receptor and TRAIL decoy receptor mRNA in these three cell lines iquantitive RT-PCR befor and after treatment hTRIAL. DNR had synergistic inhibitory effect hTRAIL on the groRNA ent of rmhTRAIL and DNR than that in those alone, RNA hTRAIL alone or in bination ia cell lines and induce cell apoptosis, DNR and rmhTRAIL have a synergistic inhibitory effect on groechanism may correlate hTRAIL；U937 cell；K562 cell；daunorubicin 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis- inducing ligand，TRAIL）是新近发现的肿瘤坏死因子超家族成员,可特异性地诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无明显杀伤作用。野生型TRAIL在稳定性、溶解性及生物活性等方面存在不足，重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（rebinant mutant human TRAIL，rmhTRAIL）是由北京沙东公司对野生型TRAIL结构进行环化变构后的优化产品，弥补了上述不足。我们以正常人胚肺成纤维细胞株MRC-5作对照，检测rmhTRAIL单用及联合柔红霉素 （daunorubicin, DNR） 对人急性单核细胞白血病细胞株U937、人慢粒红白血病变细胞株K562的促凋亡作用，并在mRNA水平分析化疗药作用前后其两种TRAIL死亡受体DR4、DR5（death receptor 4、5）和两种TRAIL诱杀受体DcR1、DcR2（decoy receptor 1、2）表达的变化，探讨rmhTRAIL治疗急性白血病的可能性及其机理，为rmhTRAIL作为新的抗肿瘤生物制剂治疗血液系统肿瘤提供理论依据。 材料和方法 主要试剂 RPMI 1640培养粉、MEM培养粉、TRIzoL试剂、胰蛋白酶、四甲基偶氮唑蓝（MTT）和二甲亚砜（DMSO）均购自 Gibco公司。新生