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　　钙信号与肿瘤论文 关 键 字: 钙信号与肿瘤 摘 要: 钙离子通道功能对细胞的功能非常重要，包括肿瘤及其转移。 细胞外大部分分子激发信号转导是通过细胞表面受体传递信息，而不穿过细胞膜脂质双分子层，通过这些受体优化和放大信号传递。受体-配体相互作用可刺激或调节细胞内第二信使或第三信使的产生。下游信使又继续激发受体依赖细胞的效应器反应。通过细胞表面受体介导跨膜信号转导基本有三类1,2：G蛋白偶连受体介导，蛋白质的磷酸化、去磷酸化，离子通道介导。 1．钙离子通道功能对细胞的功能非常重要，包括肿瘤及其转移 有许多信号转导通路可直接激活钙通道或作为钙通道的效应因子。钙离子的动员可直接通过G蛋白活化钙通道，通过受体介导钙通道活化.freelbospondin)等都可以刺激肿瘤细胞转移。体外实验细胞外基质诱导的转移行为和潜能与特定的Ga亚单位相关。Ⅳ型胶原可刺激肿瘤细胞转移，细胞内Ca2+有明显升高。当细胞外Ca2+去除，细胞内Ca2+维持不变，表明细胞内Ca2+是细胞内钙库释放所致。而这一钙信号不被百日咳毒素抑制，表明有两种独立的信号机制参与Ⅳ型胶原的刺激作用，即Ca2+动员和G蛋白活化。Ca2+也可以通过调节肌动蛋白(actin)的组装调节运动6。细胞内Ca2+升高，胶溶蛋白(gelsolin)蛋白结合于actin微丝，导致结构的改变。Actin结合蛋白增殖素(profilin)和gelsolin通过肌醇磷脂通路与Ca2+和磷脂酰肌醇二磷酸相互作用。膜磷脂、Ca2+、细胞骨架三者之间的联系进一步表明Ca2+介导的信号转导在肿瘤细胞的侵袭和转移中的重要性。 1.2 磷酸化跨膜信号转导通路与肿瘤侵袭转移 许多生长因子信号转导通路都是通过酪氨酸激酶介导受体磷酸化参与了肿瘤的转移过程。许多癌基因类生长因子刺激酪氨酸磷酸化，磷脂酶C-g是一个关键的底物7。其磷酸化导致PIP2水解为IP3，动员细胞内Ca2+，提供了受体磷酸化和Ca2+之间的联系。受体磷酸化通过磷酸化和活化磷脂酶C-g以及随后的肌醇磷酯水解引起细胞内Ca2+升高，同时还有可能引起非电压门钙通道产生的Ca2+内流。这进一步提示了Ca2+、跨膜磷酸化和肿瘤之间的联系。 2．细胞内Ca2+信号8 2.1 Ca2+作为细胞内信号的概念 对于大多数真核细胞来说，存在跨质膜的Ca2+电化学梯度，跨膜电位为70~90mV。细胞内带负电，而细胞质中Ca2+浓度远低于细胞外，不到万分之一。细胞内的细胞器如内质网、以及一些分泌颗粒中含Ca2+比细胞质中也要高一千到一万倍。这种Ca2+电化学梯度就提供了一种机制，使得细胞内Ca2+浓度变化迅速，从而使细胞的一些生理过程反应性增强，因此细胞内Ca2+浓度变化也是细胞内一种信号机制。 2.2 细胞内Ca2+浓度的测量和运动 较早期对Ca2+的测量是以总的Ca2+浓度反应细胞内Ca2+水平。通常应用一些间接的方法，如骨骼肌的收缩和舒张、分泌细胞的分泌活动、Ca2+依赖的酶活性、糖原的磷酸化酶、K+流或K+电流反映Ca2+活化K+通道。另外还可用放射性Ca2+ 45Ca2+，间接反映Ca2+浓度和Ca2+运动。 自上个世纪八十年代以来，出现了许多直接检测细胞内Ca2+浓度和Ca2+运动的方法。荧光Ca2+指示剂的应用很容易用于大多数脊椎动物细胞内Ca2+信号研究9。这些指示剂大都是Ca2+螯合剂BAPTA的衍生物，包括fura-2和indo-1。它们主要的优点是其荧光光谱因Ca2+的结合而改变。Fura-2激发光谱改变，indo-1是发射光谱改变。应用荧光分光光度仪、荧光显微镜系统，光电倍增器检测或增强照相机检测，即可获得校准的细胞内Ca2+浓度。还有其他一些指示剂在不同的实验中也得到了应用。 另外检测Ca2+运动的方法是直接测量因Ca2+运动而产生的电流。电流的检测通常用微电极穿刺的方法。但是大多数有关Ca2+功能的研究都是应用的膜片钳技术。在全细胞记录条件下，细胞内外环境的改变都可检测Ca2+电流。当应用分离膜片纪录时，在控制统一条件下，可以记录单个Ca2+通道活动。这一技术已成功用于电压门Ca2+通道的研究10。 2.3 细胞质膜上的Ca2+调控 尽管有很多机制调节Ca2+活动，控制Ca2+内流和细胞内Ca2+不正常的升高，但质膜上的转运过程最终决定了细胞内Ca2+浓度的稳定。因为质膜是一个很强的Ca2+缓冲体系。 质膜上调控细胞内Ca2+水平通常有两个机制：Ca2+-ATPase泵和Na+- Ca2+交换器。质膜上的Ca2+泵在真核细胞是普遍存在的，Na+- Ca2+交换器只存在于某些细胞类型，主要是兴奋性细胞，如神经细胞和肌细胞。Na+- Ca2+交换器可顺Na+浓度梯度摄入Na+同时偶联驱动Ca2+排出细胞。