博士德免疫印迹蛋白上样缓冲液的选择和使用.pdfVIP

BOSTER 博士德生物 Product Information 免疫印迹蛋白上样缓冲液的选择和使用 蛋白样品制备是免疫印迹（western blotting ）的第一步，也是决定实验成败的 关键步骤。在蛋白提取和定量后，就需要加入蛋白上样缓冲液对蛋白进行处理， 使蛋白样品能在接下来的电泳中分离。 目前的蛋白上样缓冲液主要为还原（变性）蛋白上样缓冲液和非还原（非变 性）蛋白上样缓冲液。 一般的抗体只能识别抗原蛋白中的线性序列结构表位 （一级结构），因此，为 使抗体能够达到结合该表位而需要将蛋白样本进行变性，使之打开折叠的空间结 构(除抗体说明书特别标注之外，一般情况下，均使用变性蛋白样品)。还原（变 性）蛋白上样缓冲液含有可完全消除蛋白高级结构的必需试剂。缓冲液中含有的 SDS 可断裂蛋白分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级 和三级结构，同时 SDS 也与蛋白疏水区结合，由于SDS 带大量的负电荷，因而 消除或掩盖了不同种类蛋白质间原有电荷的差异，使其均带有相同密度的负电荷。 缓冲液中的强还原剂DTT 则能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂，分子被解聚成 组成它们的多肽链。缓冲液中还含有甘油，确保上样后蛋白样本沉积在点样孔中。 溴缓冲液中的酚蓝染料呈蓝色，且分子量比绝大部分蛋白质小，电泳中比其他蛋 白质移动速度快，可监控电泳进程。加入还原（变性）蛋白上样缓冲液的蛋白样 品最后需100℃水浴5 分钟变性。 某些抗体识别的表位是非连续氨基酸构成的蛋白三维结构，此种情况则需要 使用非变性蛋白样品进行电泳，抗体的说明书一般会标注。非还原（非变性）蛋 白上样缓冲液不加SDS 和DTT ，蛋白样本也不需变性。 博士德提供多种蛋白上样缓冲液，客户可依据实验需要进行选择。 产品货号 产品名称及描述 规格 应用 价格(元) AR0131 SDS蛋白上样缓冲液2X （变性） 1ml ×6 SDS 地址：武汉市关山二路特一号国际企业中心3 号楼5 楼 电话：800-880-8748,(0271/2/3/5 传真：(027邮箱：boster@188.com 网址： BOSTER 在 / 平 / 凡 / 中 / 创 / 造 / 奇 / 迹 BOSTER BOSTER 博士德生物 Product Information AR1112 SDS蛋白上样缓冲液5X （变性） 1ml ×3 SDS AR1142 双色蛋白上样缓冲液4X （变性） 1ml ×6 SDS AR1142-3 双色蛋白上样缓冲液4X （变性） 1ml ×3 SDS SDSTricine 蛋白上样缓冲液2X 多肽和小蛋 AR1143 1ml ×6 80 （变性） 白SDS AR0166 蛋白上样缓冲液2X （非变性） 1ml ×6 Native PAGE 60 一． SDS蛋白上样缓冲液2X （变性）/ 5X （变性）