食管鳞癌多阶段癌变中14 3 3σ和P53表达特征及相关性分析论文.docVIP

　　食管鳞癌多阶段癌变中14 3 3σ和P53表达特征及相关性分析论文 齐义军，马远方，杜耀武，刘广超，张蕾蕾，张国民，施巩宁，张双林.freelultistage carcinogenesis of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) and in normal esophageal mucous epithelium. METHODS: Immunohistochemistry (ABC) methods ine 1433σ and P53 protein expressions in 60 cases of ESCC, nearby matched normal esophageal epithelium and a variety of ESCC precursors. RESULTS: High expression of 1433σ al esophageal epithelium ent of esophageal carcinoma from normal epithelium. Sixtyfour percent of poorlydifferentiated squamous cancer lost 1433σ expression ount of 4.8. In nearby normal epithelium of esophagus, the P53 protein expression an rank correlation analysis (P 0.05). CONCLUSION: The aberrant expression pattern of 1433σ and p53 may contribute to the formation and progression of ESCC and may predict the prognosis of ESCC patients. Proteins 1433σ and P53 have the potential to bee biomarkers for early diagnosis of esophageal cancer and endpoint molecules of ESCC prevention. 【Keys; carcinoma, squamous cell; 1433σ; genes, p53; biomarkers 0引言 食管癌是我国常见的四大恶性肿瘤之一［1］. 由于目前缺乏特异、敏感的食管癌早期诊断的分子指标，临床上首次就诊的食管癌患者大多数已发展到中晚期阶段，因此鉴定食管癌早期阶段异常的分子改变具有非常重要的意义［2］. 1433σ是一新的候选肿瘤抑制基因，野生型P53可诱导1433σ表达上调［3］. 1433σ蛋白的失表达发生于人类多种肿瘤［4］. 我们运用免疫组化技术检测了1433σ和P53在不同分化程度的鳞癌和相应癌旁正常食管黏膜上皮、各级癌前病变中的表达特征，为探索食管癌发生发展的分子机制及食管癌早期诊断的分子指标奠定基础. 1对象和方法 1.1对象 收集河南省食管癌高发区食管癌手术标本60（男31，女28）例，年龄46～70（58.2±6.8）岁；同时收集相应的癌旁食管上皮标本. 患者术前均未接受任何化疗或放疗. 所有标本离体后立即用40 mL/L甲醛固定，常规脱水、石蜡包埋，连续切片，切片厚5 μm. 病理学诊断全部为食管鳞状细胞癌(ESCC)，其中，高分化22例，中分化26例，低分化12例. 癌旁食管黏膜上皮包括正常食管黏膜上皮组织44个，基底细胞过度增生病灶38个，不典型增生病灶53个，原位癌22个. 多克隆羊抗人1433σ抗体（Santa Cruz公司）；兔抗羊二抗、ABC试剂盒、DAB底物试剂盒（北京中山生物技术有限公司）. 1.2方法 免疫组化采用ABC法. 石蜡切片脱蜡，梯度乙醇至水，PBS洗3次，柠檬酸盐抗原修复液（pH 6.0）微波处理30 min后用3 mL/L H2O2灭活内源性过氧化物酶，用1∶50的正常马血清室温孵育20 min，加20 mL/L BSA稀释至1∶200的1433σ一抗和1∶500的p53一抗置于湿盒内，4℃冰箱孵育过夜(12 h). 分别加2%BSA稀释至1∶200的生物素标记的抗山羊和抗鼠二抗，孵育45 min，ABC（1∶1∶50）室温孵育1h，二氨基联苯胺(DAB)和H2O2孵育，显微镜下观察，适时终止反应，最后苏木素复染15～30 s和封片. 阳性对照采用已知阳性切片，以PBS代替一抗做为阴性对照. 免疫组化染色结果评