苦参不同方法提取物抗鱼体车轮虫作用的研究.pdfVIP

维普资讯 长江大学学报 (自科版)2005年2月第2卷第2期 ／农学卷 第25卷第 1期 JomnalofYangtzeUniversity (NatSciEdit)Feb．2005Vo1．2No．2／AgriSciV。Vo1．25No．1 苦参不同方法提取物抗鱼体车轮虫作用的研究 张继平 ，贺顺连 (广东佛山科学技术学院动物科学系，广东佛山528231) 胡卫平 (湖南五指峰生化有限公司，湖南浏阳410300) [摘要]采用超声波、冷凝 回流及常温浸泡3种方法从苦参 中提取分离生物碱．经初步分析 ．其主要成分 为苦参碱、氧化苦参碱等。运用药理学方法对得 到的生物碱进行 了抗鱼体车轮 虫试验 ．结果显示：苦参 生物碱 能对鱼体鳃部车轮虫起到有效的驱杀作用；不同提取方法的提取物 中由于生物碱 的成分与含量有 差异．对车轮虫的杀灭效果也有显著差异 ；超声波提取物 中苦参碱 的含量最高．对车轮虫的杀灭效果也 最好，表明苦参生物碱 中对车轮虫起驱杀作用的成分主要是苦参碱。 [关键词]鱼体车轮虫I苦参提取物；治疗作用 [中圈分类号]S943 [文献标识码]A [文章编号]1673—1409(2005)02—0057—03 近几年 ，全国各地的水产养殖中都不断发生因寄生虫病暴发流行而损失惨重的事件 。顺德、南海等 地在 1999年、2000年连续出现鳗鲡、鳜鱼的车轮虫病 、指环虫病的暴发，由于缺乏有效药物治疗 ，损 失很大 ，严重危害了水产养殖业的稳步健康发展 。目前 ，国内水产用杀虫药物大都以人工合成的化学药 物为主 (如有机磷杀虫剂、重金属类杀虫剂、菊酯类杀虫剂等)，此类化学药物毒性与残留都较大 ，虫 体也易产生抗药性 ，不符合环保和健康食品要求[1]。中草药商品制剂用于水产养殖主要见于防治水产动 物细菌与病毒病 ，针对水生动物寄生虫病的制剂很少 ，也主要是见于民间使用 ，因此，生产上用药常 带有很大的盲 目性。由于植物源生物碱可通过破坏虫体的神经系统以及引起虫体拒食作用等起到驱虫杀 虫效果 引，因此 ，本试验尝试从苦参中提取生物碱用于抗鱼体车轮虫研究 ，旨在为探索研究及开发应用 中草药防治水生动物寄生虫病提供理论参考 。 1 材料与方法 1．1 药 品与仪器 苦参 (So^or口∥口PscP，zsAit)从佛山市 中医院中药房购得 ，苦参碱与氧化苦参碱标准品由湖南 五指峰生化有限公司提供 ，甲醇、氯仿等化学试剂均为国产分析纯。 DU-65o紫外可见多功能分光光度计 (Beckman)；AFQ-85A旋转蒸发仪 (上海医疗器械厂)； SARTORIUS电子天平；KQ3200DB数控超声波发生器 (江苏昆山超声仪器厂)；层析柱 (30×5cm)； 微量进样器 (北京青云仪表公司)；硅胶薄层层析板 (青岛海洋化工厂)；BS2—160自动部分收集器 ；层 析缸等。 1．2 苦参生物碱的提取 (1)超声波提取 苦参粉末 (过 6O目筛)一 甲醇浸泡一超声提取 50min (50℃，2OkHz，250 W)一过滤一过滤液减压浓缩一浓缩物加稀 乙酸溶出生物碱，冰箱放置过夜，过滤一沉淀物用稀 乙酸洗 涤数次一洗涤液与滤液合并一调 pH至 9，用氯仿提取一回收氯仿 ，得到生物碱浓缩液一等量 95 乙醇 溶解，过滤一减压浓缩回收乙醇 ，得到棕黄色膏状苦参总碱提取物 ，6O℃干燥至恒重保存待用。 (2)冷凝回流提取 苦参粉末一 甲~ --,-8o℃冷凝 回流提取 3h一过滤。滤液的提取处理同超声 波提取方法 。 [收一日期】2004—07—31 【囊一作者■介】张继平 (1972一)，男，湖南浏阳市人，硕士，佛山科学技术学院动物科学系讲师 · 维普资讯 湖 北 农 学 院 学 报 2005年 ． (3)常温浸泡提取 苦参粉末一甲醇浸泡 24h一过滤。滤液的提取处理同超声波提取方法 。 1．3 提取物成分鉴定 参照文献 [4，5]方法并适 当改良。中性氧化铝预处理后装柱，平衡，用不同方法提取物加样，