用于人血浆中蛋白质分离的在线阵列式二维常规柱液相色谱系统的建立.PDFVIP

２０１４年４月 Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．４ Ａｐｒｉｌ ２０１４ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ３４３～３４８ 庆祝《色谱》创刊三十周年暨卢佩章院士九十华诞专刊⁃研究论文 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１３．１００２０ 用于人血浆中蛋白质分离的在线阵列式 二维常规柱液相色谱系统的建立 １，２ １ １ １，２∗ 黄　 志 ，　 洪广峰 ，　 高明霞 ，　 张祥民 （１． 复旦大学化学系，上海 ２００４３３；２． 复旦大学生物医学研究院，上海 ２０００３２） 摘要：构建了一种在线阵列式二维常规柱液相色谱系统，并将其应用于分离血浆中的完整蛋白质。 该系统以１根 强阴离子交换柱作为第一维分离柱，８根阵列式反相色谱柱作为第二维分离柱。 强阴离子交换柱分离的馏分通过 十通阀被依次转移到第二维预柱上并得到保留富集，随后第二维流动相通过分流器同时将预柱上的蛋白质反冲至 分析柱上进行分离。 二维之间以及第二维阵列色谱柱之间均相互独立，从而可以提高系统分离的通量和总峰容 量。 采用该系统对血浆中的蛋白质进行了完整蛋白质水平上的分离。 该系统具有高通量和高分辨率的特点，为血 浆样品中高丰度蛋白质的去除以及血浆样品的深入研究提供了一种有效的手段。 关键词：阵列二维色谱；在线；蛋白质；血浆；蛋白质组学 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１４）０４⁃０３４３⁃０６ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｏｎｌｉｎｅ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ａｒｒａｙ⁃ｂａｓｅｄ ｔｗｏ⁃ ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ １，２ １ １ １，２∗ ＨＵＡＮＧ Ｚｈｉ ，ＨＯＮＧ Ｇｕａｎｇｆｅｎｇ ，ＧＡＯ Ｍｉｎｇｘｉａ ，ＺＨＡＮＧＸｉａｎｇｍｉｎ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ ＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００３２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓ⁃ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓａｍｐｌｅｓ ｍｏｓｔ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ ｔｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒ⁃ ｉｚｅ ｏｎ ａｃｃｏｕｎｔ ｏｆｔｈｅｗｉｄｅｄｙｎａｍｉｃｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅｏｆｉｔｓｉｎｔａｃｔｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｈｅｒｅｉｎ，ｗｅｄｅｖｅｌ⁃ ｏｐｅｄ ａ ｈｉｇｈ⁃ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ａｒｒａｙ⁃ｂａｓｅｄ ｔｗｏ⁃ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｙｓ⁃ ｔｅｍ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ ｉｎ ｏｎｌｉｎｅ ｍｏｄｅ． Ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｓｔｅｍ，ａ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｓｔｒｏｎｇ⁃ａｎｉｏｎ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ ｕｓｅｄａｓｔｈｅｆｉｒ