以二茂铁修饰碳糊电极应用于电流式葡萄糖生医感测器之研究.doc

以二茂鐵修飾碳糊電極應用於電流式葡萄糖生醫感測器之研究 汪乙生、胡真熏、林浩 南台科技大學化學工程與材料工程系 摘要 葡萄糖和氧氣藉由葡萄糖氧化酵素的催化，可產生葡萄糖酸和過氧化氫，由於二茂鐵具有導電性及催化性，故可藉以提升過氧化氫之應答電流。因此本研究以二茂鐵 (ferrocene) 修飾之碳糊電極為工作電極，在磷酸鹽緩衝溶液中偵測過氧化氫之應答電流，藉以推算過氧化氫之濃度。在25 ℃，-0.2 V 之操作電位，0.05 M 磷酸鹽緩衝溶液，以二茂鐵修飾碳糊電極 (二茂鐵:碳粉 = 3:7 ) 可得過氧化氫之偵測極限為0.01 mM H2O2，線性範圍為0.01～0.5 mM H2O2，靈敏度為 260.6 μA/cm2?mM H2O2。結果顯示經二茂鐵修飾之碳糊電極應答電流有明顯提升。得以上結果進一步將葡萄糖氧化酵素塗佈於電極表面，再以 Nafion 加以固定來測試本電極感測葡萄糖之性能。 關鍵字 : 二茂鐵、碳糊電極、電流式生醫感測器、過氧化氫、葡萄糖 1、前言 近年來，國內糖尿病患者激增一直高居國人前十大死因且罹病的年齡層逐漸下降，所以血糖監測器為一重要之研究主題。葡萄糖和氧氣，藉由葡萄糖氧化酵素的催化，可產生葡萄糖酸和過氧化氫，利用電子傳媒，在還原電位下將過氧化氫還原，產生電流訊號，即可得知過氧化氫之濃度，進而推算葡萄糖之濃度。本研究以二茂鐵 (ferrocene) 為電子傳媒來修飾碳糊做為工作電極，運用上述原理固定葡萄糖氧化酵素後在磷酸鹽緩衝溶液中偵測葡萄糖溶液之應答電流，完成葡萄糖感測器之研究。 二茂鐵 (ferrocene)，(C5H5)2Fe，是一種金屬有機化合物，由兩個環戊二烯 (cyclopentadiene) 利用π軌域和鐵子配位，形成一個像三明治的結構Miller 和Murray在電極表面以特殊材料改質形成修飾電極 (modified eletrode)，此電極可藉由外加電位提供適當電能，促使電活性物質在電極表面上進行氧化還原反應產生電流訊號並加以偵測，電極修飾法有很多種，有包埋法 (entrapment)、電聚合法 (electropolymerization)、物理吸附法 (physical adsorption)、架橋法(cross-linking)、摻合法 (blending) 等，本研究是以摻合法為研究主題，摻合法是直接將辨識元件與電極材料混合，常用的材料有碳糊 (carbon paste)、碳油墨 (carbon ink)、石墨環氧樹脂 (graphite epoxy)等，此法具有製備容易、訊號的反應時間短、電極再生方便、可同時固定電子傳媒於電極材料中和容易控制修飾電極之材料含量等優點，且有助於本電極材料運用在平版式印刷電極上，以利大量生產。 電化學法的優點是不需昂貴的儀器設備，擁有快速的訊號反應，單純的操作流程，與傳統層析和光學法相比較，電化學法較為迅速便利，此類感測器之訊號經由紀錄器之輸出數值可對分析物作精確的定量，因此具有較高的靈敏度和選擇性，因此常被運用於臨床檢驗上。 2、 實驗方法 2.1 儀器 使用電化學分析儀 (BAS 100W)，以循環伏安法 Cyclic Voltametry ( CV ) 和Time Base ( TB 模式 ) 來測定電極活性; pH meter (Metrohm 731 型) 量測各溶液之酸鹼值。循環恆溫槽 (Wisdom BC-2DT 10L) 使恆溫水在反應槽夾層循環控溫;超音波震盪器(DELTA D200);烘箱(DENG YNG);電磁攪拌器(Fargo);自製 Ag / AgCl 為參考電極以下實驗數據均相對於此參考電極;圈繞白金絲作輔助電極;單芯銅電線塗佈修飾碳糊為工作電極，以上述電極成三電極電化學系統。 2.2 藥品 Ferrocene (C5H5)2Fe (MERCK)，Hydrogen Peroxide : H2O2 ，35％Glucose Oxidase : GOD (EC 1.1.3.4 from Aspragillus miger Type X unit )(Sigma)，Graphite Carbon Powder : 碳粉 (關東化學藥品)，Ink : 印刷油墨 (景鴻塗料有限公司)，Sodium Hydroxide : NaOH (片山試藥)，Hydrochloric Acid : HCl(aq) (片山試藥)，Cyclohexanone : C6H10O (日本小島化學)，Nafion (Fluka)，Potassium Dihydrogenphosphate : KH2PO4 (林純藥工業株式會社)， Potassium Chloride : KCl (關東化學藥品)，以上藥品均為分析級。 2.3 實驗步驟