胰蛋白酶抑制因子和蜕皮激素受体基因在烟草中的转化.pdfVIP

胰蛋白酶抑制因子和蜕皮激素受体基因在烟草中的转化 摘 要 转基因植物是防治害虫的有效方法，胰蛋’白酶调节抑制因子 oostatie factor，TMOF)可以有效地抑制昆虫中肠胰蛋白酶 (Trypsin．modulating 的活性，昆虫蜕皮激素受体基因EcR和USP是调控发育的主要靶基因。本论文 构建了含TMOF和蜕皮激素受体的载体，转化到烟草植株，获得转基因烟草。 为了研究TMOF同源物基因在转基因植物广谱抗虫中的作用，我们利用人 获得阳性克隆。 植物可以成功介导昆虫的RNA干扰进而引起昆虫体内特定基因的沉默， 上，插入含棉铃虫EcR基因的内含子，构建了双价植物表达载体 PCAMBIAl301+Aea．TMOF2+ds．EcR，并鉴定获得目的载体。 利用根癌农杆菌介导的烟草遗传转化，采用冻融法转入农杆菌LBA4404 菌株，然后通过叶盘法把上述6个构建的重组载体转化到烟草中。经PCR和 GUS染色检测，所构建的以上6个植物表达载体已成功整合到烟草基因组中。 本文的结果为进一步开展抗虫转基因烟草和烟草分子育种建立了基础。 关键词：TMOF：蜕皮激素受体基因；植物表达载体；转基因烟草 ThetransformationofTMOFandthe ecdysteroid intobacco receptorgenes ABSTRACT the is effectivetocontrol Transgenicplant way oostatic inhibite the of intheinsect factor(TMOF)can activitytrypsin midgut theinsect themain dramatically．Andecdysone EcRandUSPare receptorgenes inthe of our reconstructedthe targetgenes regulationdevelopment．In paper，we vector ofTMOFandthe transformedin ecdysonereceptorgenesrespectively，then tobacco．Thereconstructedvector wereidentifiedPCRreaction． plasmids by To oftheinhibite ofTMOF tothe analysis ability analoguesgenes insect，we havereconstructedthemonovalent vectorsPCAMBIA1301 plantexpression theTMOF Aea