岛津GCMS定量分析作的业指导书.pdf

GC/MS2010 仪器使用作业指导书 （定量操作部分） 威海市疾病预防控制中心 2009 年12 月 1、定量操作过程 一个完整的方法文件包括采集参数和数据处理参数两部分。采集参数包括样品信息、GC 参 数、MS 参数、系统配置信息等参数，采集参数是在实时分析中形成。数据处理参数包括定 性参数、定量参数和碎片参数、数据浏览参数等，数据处理参数是在后处理部分产生。 2、创建化合物表 创建化合物表的目的是确定对TIC 表中哪些峰进行定性、定量处理，以及确定对这些峰处理 的定性、定量参数。 在辅助工具栏中点击创建化合物表 ，在数据浏览器中打开标准的scan 数据文件。 已经打开scan 数据文件 首先要对scan 数据进行积分处理，点击 峰积分标签。 选择峰积分标签，如果选择自动峰面积或峰高 ，则自动按峰面积或 峰高由大到小自动积分，输入要积分蜂的数量、半峰宽、最小峰面积或峰高值。如果选择详 细 ，符合以下参数的峰将被积分。输入斜率值、半峰宽的值一般输入2 或3、漂移 一般选择默认值“0 ”、时间变参一般选择默认值“1000”、最小峰面积或峰高值，峰面积、 峰高大于此值的峰才能被积分。如果要对总离子峰进行平滑处理，可在平滑方法中选择。输 入平滑次数、输入平滑参数。如果不需要平滑，则在平滑方法中选择无。选择质谱处理标签， 以下是质谱处理参数，会影响质谱库检索相似度。 点击确定完成积分。 如果以上过程中有的色谱峰没被积分，也可以选则手动积分。首先将未积分的锋在MIC 图 中放大调整到合适的位置。 点击工具栏中手动积分按钮 ，把鼠标移动至色谱峰的起点处，点击左键，在把鼠标拖至 峰的终点处，移开左键，选择基线类型。 点击确定，手动积分完成。 点击辅助栏中的定性表 。 点击TIC 标签，TIC 表中显视的是符合积分条件所有的峰。 在TIC 表中确定需要进一步处理的峰，不需进一步要处理的峰，可点击右键删除。 确定TIC 表中所有的峰都是需要进一步处理的峰后。点击菜单栏中的编辑 ，选择全部 。在此点击菜单栏中的编辑 ，点击注册到质谱处理表 。 选择下方的质谱处理标签。质谱处理表的数据是由TIC 表中注册而来，是用来进一步定性、 定量处理的峰。 在菜单栏中选择相似性检索 ，选择所有峰 。 检索显示完成后，点击确定完成。 点击关闭。点击辅助工具栏中的新向导 。此向导是用来创建目标化合物表。选择 使用当前质谱处理表是由上一步注册得到的。 点击下一步，显示当前质谱处理表中有几个峰需要进一步处理峰。 点击下一步，显示每一个色谱峰的保留时间、强度和质谱图。不需处理的峰，可把峰前的标 记去掉。 点击下一步，这一步是确定定量的方法，在定量方法中选择适当的方法。 可供选择的方法，有面积归一法、校准面积归一化法、内标法、外标法、标准加入法。定量 计算可以选择峰面积、峰高，一般选择峰面积。在矫正级别选择中选择级别号，此数目应该 是标准样品的不同浓度的点数，也是校准曲线的校准点数。 选择校准曲线类型，有直线型、点到点型、2 次方成型等。选择校准曲线是否通过零点。是 否使用权重指数，一般选择“无”。输入标样浓度单位。选择定量结果中浓度的格式，比如 输入“5 ”，定量结果保留5 位小数。如果不进行分组计算时，在分组中选择总浓度。 确定定量参数后，点击下一步。首先输入每一个标准样品的浓度，如果使用外标法，不需输 入内标量。如果使用内标法时，则在内标标准中输入内标量。在目标离子的设置中，选择用 来定量的色谱图，总离子TIC 图、MCI 多质量数色谱图，一般选择MC 质量数色谱图。参考 离子一般选择“2”~ “3 ”，个参考离子的作用起到辅助定性的作用。设置质量数精确到小数 点后几位。设置参考离子允许偏差度，输入的值越高，允许的偏差范围越宽。 点击下一步。ID#号是目标化合物的序号，可以通过上下按钮进行切换。确定保留