第八章霉菌毒素检验试卷.ppt

课后复习 食品菌相 天然食品中常检出AFTB1、AFTB2、AFTG1、AFTG2、FATM1，按照结构分为B族、G族；毒性。 酶联免疫吸附测定原理 NIV在急性毒性、皮肤毒性、细胞毒性和其他生物作用方面均比DON强。 分光光度法测海带中碘含量 原理：在碱性条件下灰化，海带中碘生成碘化物，在酸性条件下碘化物可被重铬酸钾氧化，析出游离碘，游离碘在三氯甲烷中呈紫红色，于510nm波长下，测定吸光度值，以标准曲线法定量。 1.样品处理 准确称取切碎的均匀海带试样0.20-0.3g，移入瓷坩埚中，加入10mol/L KOH溶液1ml，置于电炉上炭化，然后置600℃高温炉灰化45min，取出放至室温。以40ml水分数次洗涤坩埚内容物，将洗涤液一并转入漏斗中。 2.加样测定 漏斗编号 1 2 3 4 5 6 7 水 （ml） 40 38 36 34 32 30 0 碘标准溶液 （ml） 0 2 4 6 8 10 0 KOH （ml） 1 1 1 1 1 1 0 H2SO4 （ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 K2Cr2O7 （ml） 10 10 10 10 10 10 10 CHCl3 （ml） 10 10 10 10 10 10 10 721型分光光度计 TU－1810型分光光度计 752型分光光度计 752型分光光度计 五、752紫外-可见分光光度计操作步骤 1 通电开机预热30min。 2 调整合适的波长。 3 开机后自动显示在T％位置，开盖调0，若不为0则按0％键；然后关闭盖调100，若不为100则按0A/100％键；调整A/T/C/F键至Abs处调0，若不为0则按0A/100％键调0。 4 测样。 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 展青霉素（Patulin, Pat) OH 结构 O O O 展青霉素（Patulin, Pat)毒性 3. 毒性作用 (1) 急性和亚急性毒性 啮齿类动物的急性毒性中毒：痉挛、肺出血、皮下组织水肿、无尿，死亡。 ??(2) 致癌、致畸和致突变性 皮下注射部位引起雄性大白鼠发生局部肉瘤，经口服的实验动物未发现致癌现象。Pat对大鼠和小鼠没有致畸作用，但对鸡胚有明显的致畸作用。 展青霉素（Patulin, Pat)毒性 (3)?细胞毒性：Pat能改变细胞膜的通透性，更利于K+外流。 (4) 对免疫系统的影响：亚致死剂量的Pat对小鼠和兔的免疫系统均有影响，Pat的免疫抑制作用是可逆的而且Pat对免疫球蛋白水平 的影响具有时间依赖性。 展青霉素的污染 食品中的主要来源：是由荨麻青素、扩张青素和棒曲霉等霉菌代谢产生的，存在于腐烂水果及果汁制品中。 品 种 指标(μg/Kg ) 半成品（原汁、原酱） ≤ 100 原汁、果酱 ≤ 50 果酒 ≤ 50 罐头 ≤ 50 山楂条（饼） ≤ 50 苹果和山楂制品中展青霉素限量卫生标准 4.2 双向薄层扫描测定法 原理：用乙酸乙酯提取果汁，用1.5％碳酸钠净化样品。经双向薄层展开分离后，用薄层扫描仪进行紫外反射光扫描定量。 样品处理：鲜果、果酱加适量无水硫酸钠研磨吸收多余水分，加乙酸乙酯震荡提取过滤，滤液加稀碳酸钠振摇去杂质，乙酸乙酯在水浴上真空减压浓缩近干，用少许三氯甲烷定容供TLC用。果汁、果酒直接提取。 测定：在薄板上滴加标准液、样品液。在样品点同一垂直线上距顶端2cm处点标准液，作为位置参考点。先用横展剂三氯甲烷-丙酮横向展开后再用甲苯-乙酸乙酯-甲酸纵向展开，254nm下观察，若在Rf 0.35处有黑色斑点需做确证实验。将薄板喷3-甲基，2-苯并噻唑酮腙盐酸溶液，135℃烘烤15min，360nm下观察，呈橙黄色斑点即可确认。稀释后点样使其在线性范围内，双向展开后进行扫描定量。 最低检出限3μg/L。 图3.9 β-(1,3)-D-葡聚糖水解产物的层析 水解产物与标准葡萄糖、果糖、蔗糖、木糖溶液对照进行薄板层析，展开剂为正丁醇：无水乙醇（酸）：水＝4:1:5（V/V，上层液），以苯胺－邻苯二甲酸为显色剂，得到右图。 镰刀菌毒素 1. 单端孢霉烯族类 （