课程名称：化妆品化学.DOC

課程名稱：生物化學實驗一 日誌編號：96BCEx-39202-A___ 授課日期：2007/09/27 週次節次：第週 6、7、8節 本實驗步驟重點在於 (a) 抑制細胞內外 DNase 的活性 (b) 更有效率的除去蛋白質及 RNA 。課程名稱：生物化學實驗一 日誌編號：96BCEx-39202-A2 授課日期：2007/10/4 週次節次：第週 6、7、8節1:利用分光吸光度計進行DNA的基本測量 (1)請於課堂專心聽分光光度計的操作講解。 (2)各組領回上週Exp 1所純化之DNA sample, 取10 uL 之核酸與490 uL的dH2O於eppendorf中進行混合稀釋, 標記為S(sample)，另取500 uL的ddH2O置入另一個eppendorf之中，標記為B(blank)。 (3)先將B管之溶液放入測光管中，於吸光度計中進行歸零(波長設為260 nm)，然後將B管溶液取出放回eppendorf中，再將S管的溶液放入測光管中，分別測定溶液在260 nm, 280 nm及230 nm波長下的吸光度，登記在記錄紙上。 (4)請計算OD260:OD280的比值，並推估Exp 1 sample的原始濃度及剩餘總量。 實驗2:分光吸光度計測定之干擾(1) 將B及S之eppendorf蓋緊，置於80℃水槽中加熱 5 min (燙!) 將eppendorf取出，立即插入冰筒 3min。 按照實驗1的方法進行DNA的定量測定(230 nm 免)。 測完之後，將B及S之eppendorf蓋緊，重新置於80℃水槽中加熱 5 min (燙!) 將eppendorf取出，放置於bench上使其自然降至室溫。 按照實驗1的方法進行DNA的定量測定(230 nm 免)。 實驗3: 分光吸光度計測定之干擾(2) 將B及S之eppendorf分別加入50 uL 之2N NaOH，搖勻。 按照實驗1的方法進行DNA的定量測定(230 nm 免)。 重覆(1)的動作，再加入 50 uL之2N NaOH，一直到200 uL為止(一共repeat 3次)。 補充: OD 260 nm = main absorbance of nucleotide OD 280 nm = main absorbance of protein 260: 280 = protein contamination index OD 260 nm of 1= ~ 50 ug double strand DNA ~ 40 ug single strand DNA/RNA 評量：無(沒有隨堂考就說無) 作業：無 回應： 此次的實驗，由於分光光度計無法測得230~260nm的值，故進行得不是很順利，但是在本實驗中，學習到了如何操作分光光度計，首先要先歸0(使用一個基準液體)，調整所需要的波長(ex:300nm)，在將刻度調至該波長的範圍內(ex:3適用於290~460nm，故調到3的位置)，如此就能測得相較於基準液體的OD值，OD值的數值得能知菌的生長狀況，若是太多菌，則OD值會相對比較高，因為受到阻擋的光線較多，然而，有一種情況下測得的OD值不見得準確，就是死菌數量過多的時候，測出來的值就不適合使用。 Optical Density (OD) 記錄者：黃昱斌 教師：林翰佐 課程名稱：生物化學實驗一 日誌編號：96BCEx-39202-A___ 授課日期：2007/__10_/_11__ 週次節次：第四週 6、7、8節 授課教師：林翰佐 授課班級：39201 (生科二甲) 授課內容摘要 課程進度： 聚合脢連鎖反應法(PCR)的理論與實務操作 課程內容重點： 目的:為了解何為PCR,了解其作用目的及此實驗之原理. 內容: 1.機器開機，設定程式 2.將PCR反應所需之template,10X buffer, dNTP, primers,ddH2O及Taq enzyme分別加入，蓋緊蓋子後放入PCR機器之中。 本研究每組作兩管reaction，以組為單位依續加入反應物, 配方如下: Template: 2 uL 10X buffer: 2 uL Primers: 1 uL dNTP: 2 uL ddH2O: 12.8 uL Taq: 0.2 uL Total 20 uL 3.啟動機器，等待反應完成。 評量：無 作業：無 回應： 這節課我覺得過程很容易,只要將所有的物品安照順序並且安照一定的劑量家在一起就可以了,而這各實驗也讓我知道了PCR的功用,就是可將一小段的基因複製為原來的好多倍,感覺很神奇. 記錄者：______吳瑱碟_____ 教師：_______林翰佐_________ 課程名稱：生物