抗凝调控失调2组织因子入血，激活外源性凝血系统3血细胞大量破坏.PPT

DIC概念 DIC不是一种独立的疾病。它是一种发生在 多种疾病基础上，凝血系统被异常激活而发 生的以凝血功能失常为主要特征的系列性病 理过程. * 弥散性血管内凝血(DIC) 家兔模型及机制 凝血 抗凝血 1.内源性凝血系统 （Ⅻ因子激活开始） 2.外源性凝血系统 （Ⅲ因子激活开始） 1.完整的血管内皮； 2.血流速度相对较快； 3.单核吞噬系统作用； 4.生理性抗凝物质； 5.纤溶系统。 总之， 体内凝血与抗凝血系统的动态平衡 各种病因 激活凝血系统 凝血酶增多 大量微血栓形成 凝血因子、血小板消耗 纤溶系统激活 产生纤溶酶 FDP形成 纤溶、抗凝作用增强 出血、休克、器官功能障碍和 溶血性贫血等 1 3 2 DIC的系列病理过程 发病机理 1. 内皮细胞损伤, 凝血、抗凝调控失调 2. 组织因子入血，激活外源性凝血系统 3.血细胞大量破坏, 血小板被激活 4.促凝物质入血 5.纤溶活性的改变(继发于凝血系统激活或致病因子直接引起） 造模原理 兔脑粉含有组织因子(或称凝血致活酶）,能启动外源性凝血过程. 正常体内血液中没有组织因子，静脉注射兔脑粉后通过外源性凝血途径引起DIC. 实验目的 学习用兔脑粉浸液复制急性实验性DIC动物模型,通过本 实验所测的几项血液学实验结果,讨论急性DIC的发病机 制，初步了解急性DIC的几项血液学常规检查方法 材料 家兔、兔台、常规手术器械、25%乌拉坦溶液、双孔电热恒温水浴箱、台式离心机、721分光光度计、秒表、显微镜、号码计数器、刻度离心管（10ml）、试管、刻度吸管（2ml、5ml）、微量定量移液器、血色素吸管、毛细滴管、血球计数板配盖片、橡皮吸球、乳胶滴管、棉球和纱布，3.8％枸橼酸钠溶液、 4％兔脑粉生理盐水浸出液（临用时配制）、饱和氯化钠液、肝素、 1％硫酸鱼精蛋白液、血小板稀释液、 0.025mol／L氯化钙溶液、P试液、K试液、5ml玻璃试管、动脉夹、动脉插管 兔脑粉浸液的制备：称取兔脑粉[实验前检测其活力，以凝血酶原时间(PT)不超过12s为宜]400mg，加人生理盐水10m1，充分搅匀后放入37℃（摄氏度）恒温水浴箱内孵育60min，每隔15min搅拌一次,然后离心(1000转／min)5min，取上清液过滤后供静脉注射用。 P试液配制：实验前称取兔脑粉200mg，加入5m1生理盐水，充分混匀后放人37°C恒温水浴箱内孵育1h，在此过程中，用玻璃棒搅拌3～4次，并颠倒混匀，然后离心(1000转／min)5min,吸取上清液，再加入等量的0．025mol／L氯化钙溶液，用前摇匀，作PT实验用 K试液配制：实验前将2％白陶白生理盐水悬液1份与兔脑磷脂悬液等量混合。 实验步骤与观察指标 用25％乌拉坦溶液麻醉动物后，暴露一侧颈总动脉，结扎其远心端，用动脉夹夹闭近心端，剪口后插入动脉插管,结扎，固定之，备用取血。 复制DIC模型：取4％兔脑粉生理盐水溶液，按2.0ml／kg体重计算，将总量用生理盐水稀释至30m1，由耳缘静脉缓慢注入。 在注入兔脑粉浸液前15min、注入开始后15mln及45min，分别由颈总动脉取血样10ml一次,抗凝剂(3.8％枸橼酸钠溶液)与血液之比为1：9(V／V)，离心(3000转／min)15min，获得含微量血小板血浆作为大部分实验测定用。每次取血样时，采血1～2滴供血小板计数用。另用1.5—2.0m1置于不含抗凝剂的干净试管内，作为测定FDP用 检查急性DIC的几种血液学常规方法： (1)白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)测定 ． ①?取被检血浆0.2m1，加入小试管内，置37℃水浴中，然后加 入0.2ml K试液,混匀后孵育3min； ②加入0.025mol/L氯化钙0.2mI，开动秒表，10s后从水浴中取出轻轻侧动，至液体流动停止或出现粗颗粒时为凝固终点。 ③重复2～3次，取平均值,家兔正常值约为30sec。 ⑵凝血酶原时间(PT)测定 ①取被检血浆0.1ml，置于小试管内放于