丙型肝炎病毒 NS2蛋白在Huh-7细胞中抑制NF-κB活性.pdfVIP

维普资讯 第 l9卷4期 中 国 病 毒 学 l9 (4)：335．339 2004年8月 VⅡtoLoGICA S ICA August2004 丙型肝炎病毒 NS2蛋白在Huh一7细胞中抑制NF—KB活性 阳 帆，叶林柏料，刘 静，杨小骏，廖庆娇，余应龙，叶 力 (武汉大学生命科学学院病毒研究所，湖北武汉，430072) HepatitisCVirusNS2ProteinSuppressestheActivitiesofNF-KB inHuh．7CellLine YANGFan，YELin—bai ，LIUJing，YANGXiao-jun，LIAOQing-jiao，SHEYing—long，YELi， (InstituteofVirology,WuhanUniversity,Wuhan430072，China) Abstract：RecombinnatplasmidpCNS2wasconstructedbyinsertingHepatitisCVirusfull—lengthNS2 genebetweenXhoInad ，f，ldⅢ sitesofna eukaryoticexpressionvcetorpCDNA3．1(一)．Therceombin— natplasmidpCNS2WaSlanasfectde toHuh一7cellswiht Lipo Vce nadHCV NS2mRNA nadprotein producedint~nasientexpressionsystem WaS detectde athtetanascriptionalnadtranslationallevels， respe—ctively．TlliSindicatde htatpCNS2couldbe expressde successfullyinHuh 一7cells．Cotrnasfcetde pCNS2ofdifferentdosestoHuh 一7cellswiht reporterplasmidpNF—KB—Luc。hteactivityofluciferase controllde bv NF-KB promoter／enhnacerelementsWas detected by luciferaseaSsaykit48h after Ixnasfcetion．Th eresultsshowedhtathteexpressionofluciferaseinHuh 一7cellstanasfcetedbyhte pCNS2dcereasde abouttwotofourfoldscomparde tocontrolplasmid．ItiSsuggestde htathteHCV NS2proteindistinctlysuppressde hteactivitiesofNF—KBinadose—dependentmannerinHuh 一7cells nadthiswillenabletoinvestigateonhteroleofNS2inhtepahtogenesisofchronicHCVinfection． Keywords：HepatitisCvirus(HCV)；NS2protein：NF—KB：Suppresshteactiviyt 摘要z将丙型肝炎病毒gdcv)~结构蛋白NS2基因的全长序列插入到真核表达载体pCDNA3．1(．)CMV启动子下 游，构建成重组质粒pCNS2。用脂质体LipoVecr~转染Huh．7细胞，转染细胞内可检出NS2的mRNA和蛋白质， 表明构建的pCNS2可在Huh．7细胞内成功表达；把不同剂量的pCNS2质粒DNA与报告质粒pNF．KB．Luc共转 染Huh．7细胞，48h后检测荧光素酶活