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过表达长春花jar1 基因促进文朵灵和长春质碱的生物合成
生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( )
2017, 33 6 :62-68
过表达长春花 JAR1 基因促进文朵灵和长春质碱的
生物合成
徐岩 韩玉乾 于放 刘志文 王燕燕
(大连工业大学生物工程学院,大连 116034)
摘 要 : 通过克隆长春花JAR1 基因并在长春花叶片中瞬时过表达,研究该基因对文朵灵及长春质碱生物合成的调控。以
总cDNA 为模板,克隆JAR1 基因,并构建重组质粒pBIGD-JAR1 。经农杆菌介导瞬时转化长春花叶片后,利用半定量RT-PCR 与
高效液相分析JAR1 过表达对文朵灵及长春质碱合成的影响。结果显示,成功从长春花叶片中克隆1 700 bp 左右的JAR1 基因 ;瞬
时转化pBIGD- 的长春花叶片中 基因的转录水平高于空载体对照 ; 的过表达诱导了合成途径中关键酶基因 、
JAR1 JAR1 JAR1 CrTDC
、 、 、 的表达,以及文朵灵和长春质碱的积累。结合实验结果分析, 基因过表达可能通过促进
CrG10H CrDL7H CrSTR CrLAMT JAR1
茉莉酸 (JA)信号转导途径来诱导关键代谢途径酶基因的表达进而促进长春花中文朵灵和长春质碱的积累。
关键词 : 长春花;长春质碱和文朵灵;茉莉酸 ;茉莉酸异亮氨酸共轭物合酶 ;次生代谢调控
DOI :10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016-1176
Promoting the Biosynthesis of Catharanthine and Vindoline in
Catharanthus roseus by Overexpressing JAR1
XU Yan HAN Yu-qian YU Fang LIU Zhi-wen WANG Yan-yan
(School of Biological Engineering ,Dalian Polytechnic University ,Dalian 116034 )
Abstract: This work aims to reveal JAR1 gene regulation roles in the synthesis of catharanthine and vindoline via cloning it from
Catharanthus roseus and its transient overexpression in the leaves of C. roseus. The JAR1 gene was cloned using total cDNA as template,and
the recombinant plasmid pBIGD-JAR1 was constructed. Transiently transformed to the leaves of C. roseus mediated by Agrobacterium,HPLC
and semi-quantitative RT-
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