微生物实验室质量控制准则试卷.pptVIP

常用培养基的质量控制 （三） 菌落大小测试：划线分离测试菌，取10个菌落测量直径大小，其直径均值与新鲜配制的培养基无统计学差异。 常用培养基检定用标准菌株 甲型副伤寒沙门菌50002 伤寒沙门菌 50096 乙型副伤寒沙门茵 鸭沙门茵50083 鼠伤寒沙门氏菌 痢疾志贺菌1型5157O 福氏志贺菌2 大肠埃希菌25922（ATCC） 金黄色葡萄球菌25923（ATCC 普通变形杆菌 肺炎克雷伯菌肺炎亚种 弗劳地枸橼酸杆菌4197 绿脓杆菌27853（ATCC） 副溶血性弧菌 常用培养基质量标准 外观和理化标准： 干粉颜色：淡黄色粉末或呈现本培养基特有的颜色 溶解后培养基色泽：清晰透明（含琼脂除外）淡黄色或特有的色泽； 灭菌后的培养基PH：7.2±2℃为多；个别弧菌检验用培养基pH值偏高为：8.0 ±2℃ 生物学指标：菌落特征及菌落大小 。 培养基保存环境 制成的培养基保存环境为4℃冰箱，如制成平板则用塑料袋包装置冰箱保存， 干燥培养基干粉含有活性物质、遇热易分解的物质应仔细查看存放条件，多数也须放在2-8 ℃条件保存。 有的培养基则以存放于10-15 ℃条件为易。如含有高浓度胆盐的培养基。 养基制备控制程序 培养基配制所用的仪器设备培养基配制所用的仪器设备必须经过相应的鉴定 。 配制培养基所用的用具及容器配制培养基所用的用具及容器必须是清洁或是灭菌的，一些特殊不易洗刷清洁的玻璃器皿，必要时可用重铬酸钾硫酸清洁浸泡后，取出置5%氢氧化钠溶液浸泡数分钟，再用3%盐酸溶液进行中和，然后用清水冲洗，烘干后备用。 培养基配制原料，试剂质量控制 培养基的配制程序（一） 不同的培养基配制的程序有所不同，但一般培养基配制程序主要有以下7个步骤、调配、融化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及鉴定 。 注意点：配制时注意各类成分的用途。 pH测定干燥培养基在工厂生产时，对培养基PH进行了一定的调试，在实际工作中，由于配制的环境、配制所用的溶剂（蒸馏水）PH等条件有所不同，都会对所用的培养基PH要有所影响。因此对于干燥培养基配制，同样需要进行PH测验。 培养基的配制程序（二） 配制好的培养基（尤其是糖发酵管）不宜久放。，因为培养培养基吸收空气中的二氧化碳，会使培养基变酸，从而影响细菌的生长。 培养基中的抑制剂及指示剂一定要精确称量，抑制剂要注意合理配伍。 培养基主要原料的质量控制， 配制培养基的主要原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、胆盐、无机盐和琼脂等，这些主要原料的有劣，直接影响到培养基的质量，由此也将影响检验质量。 指标有感官、理化、物理、生物学。 培养基相关试剂的质量控制 培养基相关试剂的质量控制及阴、阳性对照菌株试验。对做生化反应的各类试剂，在配就后均应进行各项必要的鉴定。用已知阴、阳性菌株进行对照试验。对于其它如氧化酶、触酶、染色液等也同样需要经鉴定后用于试验。 不合格培养基可能的原因（一） 干燥培养基结块 l???????? 培养基过于陈旧 l???????? 培养基处于潮湿环境中 l???????? 培养基生产时水分过高 PH偏离规定值 l???????? 培养基过于陈旧 l???????? 配制时所使用的蒸馏水非中性 l???????? 培养基过度灭菌 不合格培养基可能的原因（二） 培养基不清澈 l???????? 使用了劣质水 l???????? 培养基PH值不对 l???????? 使用了不同的容器制备 l???????? 生产原料精度不够 l???????? 培养基过度灭菌 凝固温度过高 l???????? 培养基干粉用的太多 l???????? 琼脂质量发生了变化 不合格培养基可能的原因（三） 凝胶强度过低 l???????? 培养基干粉用的太少 l???????? 培养基未完全溶解 l???????? 培养基过度灭菌 l???????? 倾注前未振摇培养基瓶 l???????? 琼脂粉凝固强度较低 颜色不对 l???????? PH不正确（带指示剂的培养基） l???????? 培养基过度灭菌 l???????? 使用了不洁的容器制备 不合格培养基可能的原因（四） 培养基被污染 l???培养基灭菌不彻底 l???灭菌后存放不当而污染 l??? 实验时使用了污染的器皿 生长不良 l??可能由制备容器设备、水或样品带入抑制物 l???样品中含有亚致死性损伤的微生物 l???? PH不正确 l?????添加物（抑制剂）等浓度不当 l?????培养基过度灭菌 l?????实验时培养基或溶解样品时温度过高 不合格培养基可能的原因（五） 过分生长 l??