葡萄糖氧化酶固相酶电极在血液葡萄糖测定中的应用.PDF

维普资讯 上海 5蔷第3新 133 · 葡萄糖氧化酶固相酶电极在血液葡萄糖测定中的应用 上海海员医院 陈咨熊 华东化工学院 俞 晔 曾 瑾 苏宗贤 内窖提要 本文报告用低温辐射 引投聚台甲基丙烯酸 卢一羟乙酯 (HEMA)制成固相葡 萄暗 氧化酶膜，并与氧电极组台成酶 电极 ，用于血液葡萄糖浓度的测量。其变异系数在血糖浓度为5．83 和 llrnrnol／L时分另为 3 和 2、04％(批内)。回收率在96．5 ～l02．4 之 间。与葡萄糖氧化 酶比色法相比较： =9．9612，回归方程 ：Y=7．91+0．96X。本法具有简单 、快速、精确等优点。 关键塌 葡萄糖氧化酶 ucose-oxidase， 固相酶电极 immobilizedenzme—electrode ’ 葡萄搪测定gluc0sedetermination 运用葡萄糖氧化酶及氧 电叛组成的氧耗 =、固相葡萄镑氯化酶胰的制备 量测定法El,2]是测定血 中葡 萄糖 的一种 方 (一)尼龙网辐射接枝：称取一定量的经 法．罾外七十年代初发展固相酶技 术0 ， 洗涤烘干至恒重的尼龙网，置于 自制的辐照 将葡萄糖氧化酶固相于菜载体上，并和氧 电 器中．加入含有HEMA 10 、CuC1=o．2 极等组成酶 电板对葡萄糖的测定已用于常规 (均为重量百分浓度)的接枝水溶液 中． 工作 】．国内近几年来也已有多次报道 在 20C，0．3戈瑞／秒的粥量率下辐 照二小 。 时。取出，洗涤、烘干．即成为固相酶的基 我们用尼龙网为基材，以低温辐射引发 材 ． 聚合的方法，制成固相葡萄糖氧化酶膜 再 (二)酶膜 的制备：经辐射接枝过 的尼龙 配以自行设计研翩的铂一银／氯化银氧电极组 网，裁成一定大小。置于特制的模具中．以 合成酶电极。实验说明，我们 自制的酶电极 医用注射器将配好的酶 液 0．2ml(每ml酶 对血液葡萄糖测定具有快速，简便准确的优 液中含葡萄糖氧化酶60rag，HEMA0．3m1) 点。 缓慢地注入模具 中。然后放入盛有干冰的杜 瓦瓶内，置于辐照场中。在剂量率为 1．I戈 材 料 和 方 法 瑞／秒下辐照一小时。取出，拆除模具，即得 一 、 材料 葡萄糖氧化酶 (Sigmatype 固相酶膜。再经洗涤后浸于 o．06mol／LpH I)进 口分装． 甲基丙烯酸一日一羟乙酯 (B— 5．6的磷酸盐缓冲液内。4℃ 下保存．成品 HydroxyEthylMethcrylate，HEMA) 酶膜的外观为：在作为基材的尼龙阿上覆盖 含量 ≥96 ，双酯含量≤4 ，馥度≤O．4％， 了一层 白色的包埋有葡萄糖氧化酶的聚甲基 不含阻聚荆．其他试剂均为分析纯．尼龙网 丙烯酸 B羟乙酯。整个酶膜厚度为 90N100 厚度 85-90p． Co-v源 华东化工学 院辐 m ． 化组提供． 三 、方法 葡萄糖测量实验装置 以CY4测 氧 仪 (一)酶电极的结构与工作原理 样本中 为主体，以自行设计研制的氧电板和葡萄糖 的葡萄糖在酶膜中固相葡萄糖氧化酶的值化 氧