花粉小麦染色体工程.pdfVIP

科学通报990102 科学通报 Chinese Science Bulletin 1999年 第1期 No.1 1999 花粉小麦染色体工程 胡　含　张相岐　张文俊　景建康　王二明　王献平 摘要　花粉小麦染色体工程是结合花药培养技术与经典染色体工程技术的新程序. 它可 快速、准确地转移异源有用基因到小麦栽培品种，增加遗传多样性，供遗传学研究和 育种工作应用. 两套新程序分别建立在染色体组水平和单个染色体水平. 与经典的染色 体工程相比，它的主要特点是：(ⅰ) 产物的多样性；(ⅱ) 稳定的快速性；(ⅲ) 选择的 高效性. 实验证明，花粉小麦染色体工程是创制异源易位系，尤其是非臂间易位系的有 效途径. 应用该程序结合综合鉴定技术，分别对黑麦的1R和6R染色体上的有用基因进行 了定位和分子标记研究. 讨论了花粉小麦染色体工程与分子基因工程在作物改良中的作 用与关系. 关键词　小麦　花药培养　染色体工程　易位系　基因定位 　　按照一定的设计有计划削减、添加和代换同种或异种染色体的方法和技术称为染 色体工程，也称为染色体操作，它是在染色体水平上进行的细胞工程 ［1］ . 其基本程序 是：(ⅰ) 杂交；(ⅱ) 靠杂种减数分裂时染色体联会的规律性变化产生具有不同染色体 组成(数目和结构)的配子；(ⅲ)在杂种或杂种后代中通过细胞学鉴定，筛选所需要的材 料.　 　　近年来，由于小麦种内的遗传资源日趋贫乏，严重影响小麦品种改良. 而小麦的异 源种、属，如黑麦、山羊草、偃麦草、簇毛麦等含有许多与丰产、优质、抗逆等有关 的优良基因，因此，研究和利用异源基因，将它们转移到小麦栽培品种，增加遗传的 多样性是当前小麦遗传育种的重要课题.　但传统的远缘杂交和染色体工程操作程序繁 琐、费时、需要熟练的细胞学技术和知识，尤其是在新的鉴定技术未得到广泛应用之 前，该项研究受到很大限制.　花粉小麦染色体工程就是在这种背景下产生和发展起来 的. 1　原理与程序 　　单倍体花粉只有1套染色体，具有独特的遗传特性：(1) 花药离体培养过程中，易 ［2～4］ 产生花粉无性系变异，这种变异具有普遍性 ，变异的类型既有染色体数目变异， ［5］ ［6］ 也有染色体结构变异 ，而染色体结构变异的机制主要是断裂和重融 ，这为产生 易位系和异源基因定位开辟了新途径；(2) 离体花药培养没有有性过程，避免了受精过 程中配子类型之间的竞争，使各种配子类型得以充分保留，包括重组体和变异体，都 科学通报990102 能够在1个世代内，在花粉植株水平上较充分地表达并迅速稳定，从而可以提高选择效 率，大大缩短工程材料的培育和研究周期，在2年左右时间内就可以获得含有目的基因 ［7, 8］ 或染色体的小麦新种质 . 　　花粉小麦染色体工程结合了花药培养技术与染色体工程技术.　其基本程序是以次 生远缘杂种与普通小麦杂种一代为材料进行花药培养，1个世代即可获得遗传组成多样 的异源单倍体和纯合的异源二倍体.　再利用先进的综合鉴定技术，即可迅速、准确地 筛选出染色体工程新种质.　 　　在实际工作中，我们改进了传统的染色体工程方法，建立了两套新的程序.　(1) 染色体组水平的程序.　这是我们在80年代初期开始使用的程序.　以次生远缘杂种六倍 体小黑麦(AABBRR)与普通小麦(AABBDD)杂交，获得具有D，R两个单倍基因组的杂种 一代(AABBDR).　或以八倍体小偃麦(AABBDDEE)与普通小麦杂交，获得七倍体杂种 一代(AABBDDE).　以杂种F 1为花药培养的供试材料，根据单倍体配子类型能较充分表 达以及加倍单倍体在1个世代中稳定的原理，在较短的时间内，获得了大量含有