2016广西职业技术学校食品理化检验技术教案(上)：蛋白质和氨基酸的检验技术2.docVIP

教学内容与设计 （第二节课） 学生练习：习题集习题七第一、三大题（10分钟） 讲解练习：（5分钟） 四、氨基酸态氮的测定 　　氨基酸态氮：与测定蛋白质相比，氨基酸中的氮可以直接测定。氨基酸中的氮含量称为氨基酸态氮。 （一）双指示剂甲醛滴定法（5分钟） 1、原理 　　加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用强碱滴定。 2、操作： 　　用中性红作指示剂，先测定其它游离酸的含量 　　再用百里酚酞作指示剂测定氨基酸和游离酸的总含量。 3、方法适用范围 　　浅色样品 4、计算 教材P173 （二）电位滴定法（15分钟） 1、原理 根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，将酸度计的玻璃电极及甘汞电极（或复合电极）插入被测液中构成电池，用碱液滴定，根据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。 2、仪器与试剂 仪器 酸度计 磁力搅拌器 烧杯（250mL） 微量滴定管 试剂 pH=6.18标准缓冲溶液 20%中性甲醛溶液 0.05mol/L左右的NaOH标准溶液 3、测定操作 ①样品处理 吸取样品液于100mL容量瓶中,加水定容。吸取定容液20.00mL于250mL烧杯中,加水60mL，放入磁力转子，开动磁力搅拌器使转速适当。用标准缓冲液校正好酸度计，然后将电极清洗干净，再插入到上述样品液中，用NaOH标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2