分析化学选读--显色剂.ppt

8.3 吸光光度法的灵敏度与准确度 一. 灵敏度的表示方法:摩尔吸光系数 (?) 例1 邻二氮菲光度法测铁  ?(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38  计算? 和 解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.0×10-3/55.85 =1.8×10-5mol/L c =1.0mg/L=1.0×10-3 g /1000mL = 1.0×10-4g/100mL 二. 准确度—仪器测量误差 光度计的读数误差一般为0.2～2％(ΔT),由于T与浓度c不是线性关系，故不同浓度时的ΔT引起的误差不同。 8.4 显色反应与分析条件的选择 有机显色剂 显色反应的选择 *灵敏度高，一般ε104 *选择性好 *显色剂在测定波长处无明显吸收。 对照性好, ?λmax60 nm . *反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。 *显色条件易于控制，重现性好。 8.4.2 显色条件的确定 2. 显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定） 邻二氮菲－亚铁反应完全度与pH的关系 Fe2++3R 8.4.3 干扰及消除 2. 物理法 -- 选择适当的参比溶液 1. 仅络合物有吸收，溶剂作参比。 如 phen—Fe2+ 标准曲线 2.待测液也有吸收，被测液作参比。 如 测汽水中的 Fe 3. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe， 参比溶液为不含Li2CO3样品的所有试剂。 4. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比. 2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比. 8.5 吸光光度法的应用 1. 单一组分测定 3) 蛋白质测定—溴甲酚绿、考马司亮蓝等 4) 氨基酸测定—茚三酮(紫色化合物) 5) 水质检测: NH4+、NO2-、Mn2+、Fe2+、SO42-、Hg2+---- 6) 药物含量测定—比吸光系数定量；荷移光谱法测定. 7) 紫外吸收(UV): NO2-、NO3-、SO42-、SO32-、CO32-、SCN-、酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋白质等。 2. 多组分的测定 3. 光度滴定 典型的光度滴定曲线 4. 络合物组成的测定 1:1 表观形成常数的测定 (设M、R均无吸收) M:R=1:1 5.一元弱酸离解常数的测定 p330 MO吸收曲线 MO离解常数的测定作图法 6. 双波长分光光度法消除干扰(不要求) 双波长分光光度法消除浑浊背景干扰 7. 导数分光光度法(不要求) 常药降压片中氢氯噻嗪含量的测定 1.氢氯噻嗪. 2.硫酸双肼肽嗪 3. 盐酸可乐定 4.常药降压片 肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取 方法：肝匀浆用乙腈浸提，浸提液用6％的HClO4稀释，然后用GDX100大孔树脂萃取，用二氯甲烷5mL洗脱杀鼠剂，40℃挥干，剩余物用0.1mol·L-1NaOH4mL溶解后，紫外导数光谱测定。 8.1 了解分子对光的吸收与溶液颜色的关系. 吸收曲线—定性分析的基础。 定量分析的基础—朗伯-比尔定律：A=?bc=-lgT 式中各参数的物理意义，定量计算。 8.2 了解目视比色法、分光光度法的特点，分光光度计的基本部件。 8.3 灵敏度的表示—摩尔吸光系数的意义和计算； 准确度—适宜的测量范围、偏离比尔定律的原因。 8.4 显色反应及条件的确定: 显色剂用量、酸度、时间、温度、干扰及消除。 8.5 应用: 单一组分测定示例、多组分测定、光度滴定、络合物组成的测定、酸碱离解常数的测定。 250 290 330 ? 4 1 2 3 1 2 A A 0.0 c d a b D a.空白肝普通光谱 b.2.5 mg/L敌鼠溶液的普通光谱 c.空白肝二阶导数光谱 d.2.5 mg/L敌鼠溶液的二阶导数光谱 第八章 小 结 * A= ? b c ? =A/bc (L·mol-1·cm-1) ? 越大, 灵敏度越高: ? 104～5×104 为中等灵敏度; ? 105为高灵敏度; ? 104为低灵敏度. 100 80 60 40 20 0 T% ?c1 ?c2 ?c3 ?T ?T ?T-透光率读数误差 c ?c1 c1 ?c2 c2 ?c3 c3 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 0.7 0.4 0.2 0.1 A T% Er (36.8) 0.434 浓度测