玳玳花瓣脂氢过氧化物裂解酶基因cDNA的克隆及原核表达.pdfVIP

热带作物学报2017，38(4)：673—68l Chinese of Joumal TropicalCrops 玳玳花瓣脂氢过氧化物裂解酶基因cDNA 的克隆及原核表达 郭凤芝，许颖妍4，熊 青，刘 涛，吕恃衡，陈桂信”，余文琴8 福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所．福建福州 350002 摘 要 776 以玳玳花瓣为材料，采用RT—PCR和RACE技术，克隆了玳玳HPL基因cDNA全长，全长为1bD。 其中包含52 bp的5’非编码区，224bp的3’非编码区，1500bp的编码区(编码499个氨基酸，分子量为55．7ku)。 将该抒咒基因cDNA编码区的核苷酸序列及所推导的氨基酸序列与其他植物的m％基因cDNA序列进行比较， 推断玳玳花瓣肥￡属于13一HPL类。通过PCR扩增得到了玳玳日兕基因组全长。测序结果显示玳玳日脱基因 中包含1个长2374 bp的内含子。将分离出来的玳玳符慰基因cDNA的编码区序列插入pET一15b载体上构建原 核表达载体，在细菌BL21细胞中进行原核表达。结果表明：该编码区片段可在原核细胞中大量表达，其表达 产物分子量大小约为55ku，与13一HPL蛋白的分子量55．7ku相符。本研究为下一步利用胃PL基因cDNA进行 遗传转化研究奠定基础．将为花卉香味的遗传改良提供一条新途径。 关键词 玳玳(afn堪aM，∞fi“m)；脂氢过氧化物裂解酶；cDNA全长：原核表达 中图分类号0785 文献标识码A cDNA and of CloningProkaryoticExpressionHydroperoxide inDaidai Lyase (C￡打‘跖s口配，统豫红酩m) GU0 Tao， Fengzhi，xUYingyan+，x10NGQing，LIu LU Guixin#，SHE Shiheng，CHEN Wenqill料 sc记眦e明d l璐￡记uce可s协r“ge kch∞10昏o』Hor￡诤lllmmlPma眦ts，F埘i帆 Agricu缸ure帆dFores啊№西en咄凡z^ou，阿i矾35∞D2，饥i尼o AbstractInthis full cDNAof research，thelength Hydmpemxidelyase(日P已)fromDaidai(Ci打瑚帆r锄fi“m) wasclonedRT—PCRandRACEandtriedto this inEcoZi．ThecDNA ofDaidai petals bv expressgene sequence 7 1 776 containedan 499aminoacid 5 untmnslated 上，咒was bplong．It 0RFencoding residues(Mw=55．7ku)，a a of224 日