重大动物疫病采样监测技术试卷.ppt

重大动物疫病采样 监测技术 中牟县动物疫病预防控制中心 席双艺 一、畜禽血液采集技术 （一）、血液采集的要求： 1、所有采血用具均应事先消毒、干燥处理； 2、采血部位要进行剪毛、清拭并按常规进行消毒。 3、怀疑传染病时，采血过程要防止到处流散，检后的残余血液及所用器皿要进行消毒处理。 4、需抗凝的要加入抗凝剂。 5、需分离血清的血液，试管要静置、斜放，便于血清晰出。 6、注意安全。 二、各种畜禽采样方法及部位 （一）、牛:多采用颈静脉采血、尾静脉采血。 1、颈静脉采血一般在颈静脉沟的上1/3和中1/3交界处的颈静脉内。 2、尾静脉采血在尾根腹侧中部。 牛颈静脉采血 牛颈静脉采血 牛尾静脉采血 （二）、猪：多采用耳静脉采血、前腔静脉采血 1、耳静脉采血（适用于大猪）在耳下缘1/2处。 2、前腔静脉采血，胸浅窝内，即在第一肋骨和胸骨柄结合处前方。 猪耳静脉采血 猪前腔静脉采血 猪前腔静脉采血 （三）、家禽：多采用鸡翅内侧静脉采血、鸡心脏采血 1、鸡翅内侧腋静脉，肉眼可见。 2、鸡心脏采血，鸡仰卧保定，鸡头部朝向，拔去胸上部少许羽毛，用手指在胸骨上方、嗉囊下方摸得一凹窝，右手持针，自胸骨上方凹窝斜向前下方心脏方向刺入，边刺边抽动活塞，若刺入心脏，便有血液涌入注射器，术毕，局部消毒。 注意：此法采血后，多会引起鸡只死亡，仅适用于淘汰鸡的采血。 鸡翅静脉采血 鸡翅静脉采血 鸡翅静脉采血 鸡心脏采血 三、畜禽病料采集技术 （一）、样品采集的原则 1、适时采样。根据检测要求及检测对象和检验项目的不同，选择适当的采样时机十分重要。样品是有时间要求的，应严格按规定时间采样，有临床症状需要作病原分离的，样品必须在病初的发热期或症状典型时采样，病死的动物，应立即采样。 2、合理采样。根据诊断检测的要求，须严格按照规定采集各种足够数量的样品外，不同疫病的需检样品各异，应按可能的疫病侧重采样。对未能确定为何种疫病的，应全面采样。 3、典型采样。选取未经药物治疗、症状最典型或病变最明显的样品，如有并发症，还应兼顾采样。 4、无菌采样。供病原学及血清学检验的样品，必须无菌操作采样，采样用具、容器均须无菌处理，尸体剖检需采集样品的，先采样后检查，以免人为污染样品。 5、适量采样。采集样品的数量要满足诊断检测的需要，并留有余地，以备必要时复检使用。 6、样品处理。采集的样品应一种样品一个容器，立即密封，根据样品的性状检验要求的不同，作暂时的冷藏、冷冻或其它处理。 7、安全采样。既要保护采样人员，以要防止病原外泄，还要防止样品受到污染。 8、样品包装。主要是密闭，防止样品损坏、污染和外泄等意外发生。 9、迅速送检。应尽快送实验室进行检测，延误送检时间，会影响到检测质量和结果的可靠性。 四、组织样品的采集 组织样品一般由扑杀动物或病死动物解剖采集。从尸体采样时，先剥去动物胸腹部皮肤，以无菌器械将腹腔打开，根据检验目的和生前疫病的初步诊断，无菌采集不同的组织。 1、病毒检验样品。作病毒检验的组织，必须以无菌技术采集，组织应分别放入灭菌的容器内并立即密封，贴上标签，放入冷藏容器立即送实验室。如果时间较长，可作冻结状态运送。 2、细菌检验样品。供细菌检验的组织样品，应新鲜并以无菌技术采集。如遇尸体已经腐败，某些疫病的致病菌仍可采集于长骨或肋骨，从骨髓中分离细菌。采集的所有组织分别放入灭菌的容器内并立即密封，贴上标签，放入冷藏容器立即送实验室。 猪解剖采样 五、粪便样品的采集 1、病毒检验样品。分离病毒的粪便必须新鲜。少量采集时，以灭菌的棉拭子从直肠深处或泄殖腔粘膜上蘸取粪便，并立即投入灭菌的试管内密封，或在试管内加入少量PH7.4的保护液再密封。贴上标签冷藏送实验室。 2、细菌检验样品。作细菌检验的粪便，最好在动物使用抗菌药物之前，从直肠或泄殖腔粘膜上采集，采样方法与供病毒检验的相同。可投入无菌缓冲盐水管内，贴上标签冷藏送实验室。 3、寄生虫检验样品。粪便样品应选取新排出的或直接从直肠内采得，以保持虫体或虫体节片及虫卵的固有形态，一般寄生虫检验的粪便用量较多。采得的粪便以冷藏不冻结状态送实验室。 粪便采集用品 粪便采集用品 粪便采集用品 六、畜禽疫病的样品采集 （一）、口蹄疫样品的采集 口蹄疫病毒在病畜的水疱皮内及其淋巴液中含毒量最高。在水疱发展过程中，病毒进入血流，分布到全身各种组织和体液。在发热期血液内的病毒含量最高，退热后在奶、尿、口涎、泪、粪便等都含有一定量的病毒。 1、组织样品 （1）、样品的选择：用于病毒分离、鉴定的样品以发病动物未破裂的水泡皮和水泡液为最好。对临床健康但怀疑带毒的动物可在扑杀后采集淋巴结、脊髓、肌肉