跳跃运动对OPG%2fRANKL%2fRANK骨代谢信号通路影响实验的研究.pdfVIP

跳跃运动对OPG/RANKL/RANK 骨代谢信号通路影响的实验研究 中文摘要 中文摘要 研究目的： 应力刺激是骨重塑过程中受到的最基本刺激之一。适当的应力刺激可以促进 骨细胞的生长、分化和功能的维持，但过度或持续时间过长的机械力刺激会对骨 细胞造成损害，其机制是骨细胞对应力刺激信号的感应及转换为生物化学信号的 过程，骨保护蛋白、核因子κB 受体活化因子及其配体骨代谢信号通路是对应力敏 感的通路之一。OPG/RANK/ RANKL 信号通路是骨吸收与骨形成保持动态平衡的 关键。此外，骨代谢信号通路也可以受激素调控，甲状旁腺激素是骨代谢信号通 路重要的调控激素。持续运动应力刺激必然伴有运动应激，应力与应激是否能够 在信号通路上形成共刺激。因此，本实验研究跳跃运动下，OPG、RANKL 的变化 规律，以及甲状旁腺激素对骨代谢信号的调控规律，从基因水平来研究骨代谢， 为其他的研究提供实验依据。 研究方法： 本实验采用自制半自动调时调压大鼠跳跃笼对大鼠进行 6 周的跳跃运动，运 动之后处死大鼠取血及胫骨。HE 染色切片观察骨组织的内部变化，采用酶联免疫 吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA ）法测定血清PTH 的含量， 实时荧光定量PCR （Real-time PCR ）测定胫骨组织OPG、RANKL 的mRNA 水平。 分析应力、应激的刺激下OPGmRNA、RANKLmRNA 的变化规律。 研究结果： 1、HE 染色切片中，随着跳跃运动负荷的增加板层纤维排列开始紊乱，骨陷 窝数量逐渐增加，骨陷窝逐渐增大，骨小梁疏松，骨溶解区域逐渐增大。 2 、对照组2 周、4 周、6 周大鼠甲状旁腺激素变化差异，无统计学意义 （P ＞ 0.05 ），跳跃2 周、4 周与 6 周之间大鼠甲状旁腺激素的含量有差异(P＜0.05)，具 有统计学意义。跳跃负重2 周、4 周与6 周间大鼠甲状旁腺激素的含量有显著性差 异，具有统计学意义 （p ＜0.01 ）。跳跃负重组均高于对照、跳跃组。 3、2 周对照组、跳跃组、跳跃负重组大鼠OPGmRNA 的表达量逐渐递减，有 显著性差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）；4 周对照组、跳跃组、跳跃负重组大鼠 OPGmRNA 的表达量先增加后减少，有显著性差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）； I 中文摘要 跳跃运动对OPG/RANKL/RANK 骨代谢信号通路影响的实验研究 6 周对照组、跳跃组、跳跃负重组大鼠 OPGmRNA 的表达量是明显增加后减少， 有显著性差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）。2 周对照组、跳跃组、跳跃负重组大 鼠RANKLmRNA 的表达量有了轻微的增加，有显著性差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）；4 周对照组、跳跃组、跳跃负重组大鼠RANKLmRNA 的表达量先增加后 减少（P ＜0.01 ），有显著性差异，具有统计学意义；6 周对照组、跳跃组、跳跃负 重组大鼠RANKLmRNA 的表达量逐渐递增，有显著性差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）。2 周对照组、跳跃组、跳跃负重组大鼠OPG/RANKL 比值逐渐递减，有 显著性差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）；4 周对照组、跳跃组、跳跃负重组大鼠 OPG/RANKL 比值逐渐增加，有显著性差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）；6 周对 照组、跳跃组、跳跃负重组大鼠 OPG/RANKL 比值先明显增加后减少，有显著性 差异，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）。 4 、PTH 与OPG、RANKL 具有显著相关性，具有统计学意义 （P ＜0.01 ）。 研究结论 1、大负荷的跳跃运动不但不会达到健骨的作用，反而还会影响骨的正常代谢， 破坏骨吸收与骨形成动态平衡，骨组织被过度吸收，造成骨的微损伤甚至骨折。 2 、应力刺激引起了应激水平的变化，不同组别大鼠的甲状旁腺激素的含量不 同，随着跳跃运动负荷的增加，甲状旁腺激素的含量也随之增加，大负荷跳跃运 动可能会引起甲状旁腺激素的急剧增加。 3、不同运动负荷的大鼠OPGmRNA、RANKLmRNA 表达量及OPG/RANKL 比值不同