培养基灌装验证(市局培训资料2010-12).ppt

培养基灌装验证 培训者： 杨小忠 2010年12月 E-mail: xiaozhong.yang@ 培训的内容 介绍培养基灌装的过程 介绍培养基失败后的调查 介绍培养基灌装的检查 案例分析 问与答 培养基灌装的过程 培养基灌装试验的目的 证明在无菌粉针分装过程中所采用的各种方法和各种规程以防止微生物的水平达到可接受的合格标准的能力，或提供保证所生产产品的无菌性的可信限度达到可接受的合格标准的证据。 验证前的准备 需要完成的验证 公用设施确认和验证 空调系统的确认和验证 水系统的确认和验证 其它设施的验证 设备的确认和验证（IQ,OQ,PQ等） 灭菌工艺的验证 无菌室消毒验证 湿热，干热灭菌工艺 在线灭菌验证 除菌过滤的验证 过滤器的泡点测试 清洗验证 胶塞的清洗 瓶子的清洗 计算机验证 验证前的准备 主要程序的建立 人流，物流的确定 设备使用要求和参数 无菌室消毒和维护的要求 粒子和微生物监控的要求和频率 …….. 人员培训 设备使用的培训 人员的更衣培训和无菌技术的培训 取样的培训 培养基灌装的一般流程（粉针剂） 培养基灌装的方法 方法1 灌装培养基液体，然后压塞，轧盖 方法2 灌装干粉培养基，然后加入注射用水，压塞，轧盖 方法3 灌装惰性粉末，再加入液体培养基，压塞，轧盖 培养基的准备（1） 培养基选择 常用培养基 SCDM培养基（Soybean-Casein Digest Medium） 特殊培养基 FTM培养基（Fluid Thioglycolate Medium） 培养基的准备（2） 培养基的消毒 过滤灭菌 (0.2um filter) 优点：不会破坏培养基本身的性质 缺点：过滤时易堵塞，增加了无菌操作 蒸汽灭菌 要求：－整个灭菌过程，必须要进行严格地验证－灭菌后，培养基必须完成生长促进试验 优点：灭菌后，减少了无菌操作 缺点：容易使培养基失活 培养基的准备（3） 预培养 72小时的预培养 培养温度：30～35 C 检查：液体纯清，无絮状物 培养基的转移 转移进入无菌区，容器外表面应进行蒸汽消毒 惰性粉末的准备 （1） 选材要求： 无活性 易灭菌 易溶解 对培养基促进生长作用无副作用 易灌装，流动性要好 种类 聚乙二醇Polyethylene glycol 系列(PEG 6000,PEG 8000）, 甘露醇Mannitol，乳糖Lactose等 惰性粉末的准备 （2） 灭菌 应进行伽马辐照灭菌（钴60辐照灭菌，用量15～25kGy） 测试 无菌性的测试 抑菌性测试 溶解度的测试 容器（瓶子） 的选择 选瓶原则： 首次验证 瓶口最大，灌装速度最慢 确认验证 轮换 注意事项 棕色等影响目检的瓶子，需要更换 瓶子和瓶口均小，但灌装速度很快，实际操作时，干预频率高的，验证时也应考虑 橡塞的选择 选择的原则：无抑菌作用的橡塞 测试：应对橡塞进行抑菌作用的测试 灌装设备的选择 惰性粉子的灌装设备 液体的灌装设备 其它设备的准备 其它设备 应按SOP要求进行清洗，灭菌 记录 应按SOP要求进行安装 非常非常重要 取样 注意无菌操作是否规范 灌装剂量的确定 培养基的剂量 不小于瓶子体积的10％ 惰性粉末的剂量 不小于100mg/1 ml media 注意事项 灌装体积的多少，应充分考虑瓶子倒转或旋转时，培养基能充分地接触到容器和密封件的内表面 培养基灌装的执行-最差条件的设计（1） 灌装数量：5000～10,000瓶 备注：生产批量小于5000瓶，按最大批量进行 灌装运行速度：最低灌装速度或 ? 的最低的灌装速度 瓶子的要求： 首次验证：选择最大瓶口的瓶子 确认验证：可以轮换不同的瓶子 培养基灌装的执行-最差条件的设计（2） 手工灌装 模拟日常班次轮换，暂停/休息和更衣过程：2班或3班的变化，中午/晚饭的休息时间，进出的更衣等 模拟常规干预操作 模拟装量的核对 模拟装量的调节 模拟物料的添加（橡塞，粉子等） 模拟瓶子堵塞，橡塞堵塞，粉子堵塞等的操作 模拟非常规干预的操作更换灌装头，更换或调节剂量盘，修理传送带等 培养基灌装的执行-最差条件的设计（3） 人员的要求（每次要求） 参加无菌操作的人员（操作工，QC，工程部等）每年至少参加一次验证 验证时，在无菌操作的人员应不少于日常生产时的操作人员 设备等储存时间的验证（首次验证和每年一次） 灌装的设备，储罐，灭菌后原料，胶塞等的储存的最长时间应在培养基灌装验证中得到验证 最长生产时间的确认（首次验证和每年一次） 培养基的灌装时间一般要大于等于最长的生产时间 培养基灌装的执行-最差条件的设计（4） 设备的安装和连接 培养基灌装时设备的安装和连接应和日常时设备的安装连