染色体组分析法与小麦的合成.pdf

染色体组分析法与小麦的合成 验证普通小麦的起源与演化 主要内容 • 小麦的染色体数目统计与倍性分析 • 染色体组分析法与小麦的染色体组型 • 验证普通小麦的D染色体组来源： （1）柱穗山羊草与粗山羊草的染色体组分析 （2）“人工合成六倍体小麦”与“木原小麦” • 验证普通小麦的D染色体组来源： 1 5B“ ” （ ） 抑制因子 2 （ ）染色体组分析法的局限性 “地球的历史是写在它的岩层上，而 有机体的历史则是刻在它的染色体 上。”——木原均（Hitoshi Kihara） • 通过对小麦属（Triticum）和山羊草属 （Aegilops）的研究确立了染色体组 （Genome）的概念； • 由于染色体组概念的确立，首创了染色体 组分析的方法（Genome analysis method）； • 由于染色体组分析方法的应用，阐明了普 通小麦的起源； • 用与小麦近缘的几个物种，通过远缘杂交 和杂种染色体加倍人工合成普通小麦； 小麦的染色体数目统计与倍性分析 1918年，证实小麦的三个自然组各 自的染色体数为n=7, 14, 21，从而 认识到： 多倍性在小麦进化过程中起着主要 的作用。 Hybridisations events involved in the evolution of bread wheat, Triticum aestivum. The X2 refers to the doubling of the chromosome complement which gives rise in fertile hybrids. 染色体标本的制备：根尖压片法 1. 6h 取材：把小麦种子预先浸泡 ，然后转入垫有湿润滤纸的 25 1~2cm 培养皿中，置 ℃温箱中发芽，幼根长至 ，于上午 9:00-10 00 ： 剪下根尖。 2. 预处理：将剪下的根尖置于0.02%秋水仙碱溶液中，浸泡 4h 处理 。 3. - 3:1 固定：用水洗净处理过的根尖，经甲醇冰醋酸（ ）固 6~12h 95% 85% 0.5h 定 ，再经 乙醇、 乙醇各浸泡 ，最后转 70% 4 入 乙醇中， ℃保存备用。 4. 解离和染色：取出根尖，用蒸馏水洗净，放入1mol/L HCl 60 8~10min 45% 中 ℃解离 。解离后的材料于 冰醋酸中软化 40~50min，之后用蒸馏水冲洗。用改良苯酚品红染色 12~24h后进行压片。敲好的玻片在显微镜下观察，选择 染色体分散好，形态清晰的标本，经冷冻脱片封片法制成 永久制片。 染色体数目的统计与倍性分析 对染色体标本进行仔细观察，每种麦类植 物挑选30~100个分裂中期的细胞进行染色 体数目统计，以此分析植物染色体的倍性。