胃癌复发相关的DNA甲基化芯片及DGKZ基因在胃癌、肝癌细胞系中的表达.pdfVIP

是非常重要的。然而，已经证实对早期胃癌患者进行术后常规随访对检测复发是 没有意义的 17 。因此，研究可以识别患者的亚组具有更严重的疾病的具体因素是 非常有必要的。最近,一些研究表明,病理因素如淋巴结状态,肿瘤浸润深度和肿 瘤大小在预测胃切除术后复发中起了重要作用 18,19。然而,使用常见的临床病理因 素很难预测复发。癌基因、抑癌基因,细胞周期调控因子和 DNA 修复基因,这些生 物标记与肿瘤起源、生长、侵袭转移密切相关。许多调查人员正在在这些分子标 志物中寻找新的预测因子。在先前的研究中,我们评估了p53, bcl-2,bax,c-myc 等生物标记的在于此胃癌预后方面的价值,发现 bcl-2 与胃癌患者的预后密切相 20 关 。 表观遗传学是指研究在没有细胞核 DNA 序列改变的情况时，基因功能的可 逆的、可遗传的改变。这些可遗传的改变发生在分化过程中，并在多次细胞分裂 循环中稳定存在，使得细胞获得与其他细胞不同的明显特征。表观遗传修饰主要 包括 DNA 甲基化、基因沉默、组蛋白乙酰化以及 RNA 编辑。表观遗传对于哺 乳动物的正常生长以及特异性基因表达有着至关重要的作用，当表观遗传发生异 常改变时，将会抑制许多细胞信号通路并导致疾病的发生，包括癌症的发生 21,22 。 研究发现，在人类肿瘤细胞中，除了基因序列发生了改变，其表观遗传同样发生 了异常，这些突变的基因和异常的表观遗传在整个癌症过程中相互作用，共同促 进癌症的发生与发展 22-24 。众所周知，癌症的发生是由于某些基因的灭活或者活 化引起，但研究发现，表观遗传改变在一些癌症中起着初始启动作用 25 。这些发 现，说明研究表观遗传异常有助于理解癌症的发生与发展 26 。另外，表观遗传异 27 常不同于基因突变，它是个可逆的改变，通过治疗可以使其恢复到正常水平 。 DNA 甲基化是最常见的一类表观遗传修饰，在调节基因表达和染色质结构 方面起着重要作用。DNA 甲基化是指在胞嘧啶的5’位置添加一个甲基，形成 5’- 甲基胞嘧啶，通常发生在DNA 的 CpG 双核苷上，CpG 双核苷在 DNA 序列上并 不是均匀分布，通常在 DNA 序列上呈现聚集现象，这样的区域称为 CpG 岛28,29 。 CpG 岛富含鸟嘌呤和胞嘧啶，通常位于基因的 5’端并且 60%属于启动子区，大 30 小约 1kb 。正常情况下，基因的CpG 位点在组织分化过程中容易发生甲基化， 31 但 CpG 岛却并无任何改变 。DNA 甲基化通过抑制或促进调节蛋白的生成导致 基因沉默，比如研究显示，DNA 甲基化通过阻断转录因子与靶基因结合位点， 进而抑制了 c-myc 基因的转录激活 32 。因此，DNA 甲基化在调节基因表达方面 有着非常重要的意义。 目前，关于DNA 甲基化对癌症的发生与发展所起的作用正逐步被发现 33,34 。 其中，癌症的表观基因组显示，全基因组呈现低甲基化，而散在的特异 CpG 位 点则表现为高甲基化，这些高甲基化位点激活原癌基因，同时使抑癌基因沉默， 导致了癌症的发生 22 。近年来，不断有研究发现，参与DNA 修复、细胞循环和 凋亡的抑癌基因如 Rb 、p16 、MLH1 和 BRCA1 因甲基化而使基因沉默，导致肿 瘤的发生 22,23,35,36 。另外，DNA 甲基化除了直接作用在抑癌基因的DNA 序列上， 它还可以间接通过甲基化转录因子，抑制转录激活，从而达到基因沉默的结果， 比如GATA-4 和 GATA-5 启动子的甲基化导致的下游靶序列失活而导致了胃癌发 生 37 。DNA 修复基因的沉默加速了基因的损伤突变，也使得癌症更加容易出现。 因此，DNA 甲基化在癌症发生与发展中起着重要作用。 ζ-甘油二脂激酶（diacylglycerol kinase zeta , DGKZ ）是甘油二脂 激酶家族（diacylglycerol kinase , DGKs ）的一个亚型，属于蛋白编码基 因，位于染色体 11p11.2。DGKZ 的基因序列，包括两个保守的碳端催化区，两 个结合 1,2 甘油二脂（diacylglycerol, DAG ）的锌指结构（如图 1）。其生化作用 是在 ATP 提供能量下，DAG 生成磷脂酸（phosphati