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日本岛津UV2550分光光度计 操作培训
山东安和安全技术研究院有限公司
检测部
Tel: (0543) 3065070 E_mail: bzsa163.com;紫外-可见吸收光谱
吸收光谱的测量-----Lambert-Beer 定律
紫外-可见分光光度计仪器组成
分析条件选择
UV-Vis分光光度法的应用
紫外-可见分光光度计的维护和保养
UV-Vis方法是分子光谱方法,它利用分子对外来辐射的吸收特性。
UV-Vis涉及分子外层电子的能级跃迁;光谱区在160~780nm.
UV-Vis主要用于分子的定量分析,但紫外光谱(UV)为四大波谱之一,是 鉴定许多化合物,尤其是有机化合物的重要定性工具之一。 ;紫外-可见吸收光谱;电磁波谱;
一、分子吸收光谱的形成
1. 过程:运动的分子外层电子--------吸收外来外来辐射------产生电子能级跃迁-----分子吸收谱。;2. 能级组成:除了电子能级(Electron energy level)外,分子吸收能量将伴随着分子的振动和转动,即同时将发生振动(Vibration)能级和转动(Rotation)能级的跃迁!据量子力学理论,分子的振-转跃迁也是量子化的或者说将产生非连续谱。因此,分子的能量变化?E为各种形式能量变化的总和:
其中?Ee最大:1-10 eV; ?Ev次之:0.05-1 eV; ?Er最小:?0.05 eV
;能级跃迁示意图;各轨道能级高低顺序:???? n??*??*;
可能的跃迁类型:?-?*;?-?*;?-?*;n-?*;?-?*;n-?*;?-?*:C-H共价键,如CH4(115nm);C-C键,如C1H6(135nm),处于
真空紫外区;
?-?* : 和?-?*跃迁:尽管所需能量比上述?-?*跃迁能量小,但波长仍处于
真空紫外区;
n-?*:含有孤对电子的分子,如H1O(167nm);CH3OH(184nm);CH3Cl
(173nm);CH3I(158nm);(CH3)1S(119nm);(CH3)1O(184nm)
CH3NH1(115nm);(CH3)3N(117nm),可见,大多数波长仍小于
200nm,处于近紫外区。
以上四种跃迁都与?成键和反键轨道有关(?-?*,?-?*,?-?*和n-?*),跃迁能量较高,这些跃迁所产生的吸收谱多位于真空紫外区,因而在此不加讨论。
只有?-?*和n-?*两种跃迁的能量小,相应波长出现在近紫外区甚至可见光区,且对光的吸收强烈,是我们研究的重点。 ;几个概念:
生色团(Chromogenesis group):
分子中??有非键或?键的电子体系,能吸收外来辐射时并引起n-?* 和?-?*跃迁,可产生此类跃迁或吸收的结构单元,称为生色团。
助色团(Auxochromous group) :
含有孤对电子,可使生色团吸收峰向长波方向移动并提高吸收强度的一些官能团,称之为助色团。
红移或蓝移(Redshift or blueshift):
在分子中引入的一些基团或受到其它外界因素影响,吸收峰向长波方向(红移)或短波方向移动(蓝移)的现象。
;吸收光谱的测量Lambert-Beer 定律;
一、透射率T%?;
当入射光波长一定时,待测溶液的吸光度A与其浓度和液层厚度成正比,即
k 为比例系数,与溶液性质、温度和入射波长有关。
? 当浓度以 g/L 表示时,称 k 为吸光系数,以 a 表示,即
? 当浓度以mol/L表示时,称 k 为摩尔吸光系数,以? 表示,即
? 比 a 更常用。? 越大,表示方法的灵敏度越高。? 与波长有关,因此,? 常以??表示。
; 样品吸光度 A 与光程 b 总是成正比。但当 b 一定时,A 与 c 并不总是成正比,即偏离 L-B 定律!这种偏离由样品性质和仪器决定。
1. 样品性质影响
a)待测物高浓度--吸收质点间隔变小—质点间相互作用—对特定辐射
的吸收能力发生变化---? 变化;
b)试液中各组份的相互作用,如缔合、离解、光化反应、异构化、配
体数目改变等,会引起待测组份吸收曲线的变化;
c)溶剂的影响:对待测物生色团吸收峰强度及位置产生影响;
d)胶体、乳状液或悬浮液对光的散射损失。 ;2. 仪器因素
仪器因素包括光源稳定性以及入射光的单色性等。
a)入射光的非单色性:不同光对所产生的吸收不同,可导致测定偏差。
;紫外-可见分光光度计仪器组成;
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