纳米金生物条形码技术检测坚果中的黄曲霉毒素b1 - 现代食品科技.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.8 纳米金生物条形码技术检测坚果中的黄曲霉毒素B 1 余宇燕，王彤颖，邹艳辉，高璇，邱亚利 （福建中医药大学药学院,福建福州 350122） 摘要：利用金纳米颗粒、黄曲霉毒素B (AFB )多抗和互补纳米金探针链、条形码DNA 链制备纳米金探针（NP ），纯化后进行透 1 1 射电子显微镜（TEM ）、紫外-可见光谱（UV-vis ）和浓度鉴定。将其与黄曲霉毒素 B1 单抗修饰的磁性微球探针（MMP ）通过抗原 抗体作用连接，制备 MMP-AFB1-NP 三明治复合物结构，利用实时荧光定量 PCR （FQ-PCR ）检测在高温低盐条件下解链的条形码 DNA ，通过考察反应结束后每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数值与相应起始模板拷贝数之间的线性相关程 度，建立黄曲霉毒素 B1 的生物条形码检测方法，并对检测体系进行了方法学评价。结果表明，本实验所建立的方法具有快速灵敏、 特异性高等特点，每个模板的循环数值与该模板的起始拷贝数的对数具明显的线性关系 y=-2.9054x+54.581 ，r=0.9991 ，检测灵敏度远 -8 远超过酶联免疫吸附法（ELISA ）可达10 ng/mL ，批间批内差值匀小于5%，用建立的生物条形码检测方法（BCA ）对结构类似物 进行特异性交叉试验，特异性良好。本法可用于花生、腰果等坚果类食品中AFB1 的痕量检测。 关键词：黄曲霉毒素 B1；生物条形码；三明治结构；荧光定量PCR；坚果 文章篇号：1673-9078(2016)8-278-283 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.8.042 Detection of AFB in Nuts by a Nanoparticle-based Bio-Barcode Assay 1 YU Yu-yan, WANG Tong-ying, ZOU Yan-hui, GAO Xuan, QIU Ya-li (College of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, China) Abstract Gold nanoparticle probes (NP) were prepared using gold (Au) nanoparticles, AFB polyclonal antibodies, a complementary gold 1 nanoparticle probe, and barcode DNA, an