荧光光谱法研究尼麦角林与牛血清白蛋白的相互作用 - 西南民族大学 .pdf

第40 卷第4 期 西南民族大学学报·自然科学版 Jul 2014 Journal of Southwest University for NationalitiesNatural Science Edition ___________________________________________________________________ doi: 10.3969/j.issn.1003-4271.2014.04.07 荧光光谱法研究尼麦角林与牛血清白蛋白 的相互作用 陈佰灵, 仇丽颖, 李婧, 刘晖, 郭芷含, 赵志刚 (西南民族大学化学与环境保护工程学院, 四川成都 610041) 摘 要: 目的: 模拟正常人体生理条件下, 采用荧光光谱技术研究尼麦角林与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的机制. 方 法: 通过荧光光谱法确定尼麦角林对BSA 荧光淬灭的机制, 采用Stern-volmer 方程和Lineweaver-Burk 双倒数方程计算 反应的猝灭常数和形成常数, 采用双对数方程计算两者结合常数和结合位点数, 热力学公式计算反应前后焓变和熵变 确定两者结合的主要作用力类型. 结果: 尼麦角林在0.25×l0-4~2.25×l0-4 mol ·L-1 浓度范围内, 对BSA 的内源荧光有较强 的淬灭作用, 淬灭类型属于静态荧光淬灭. 在温度25 ℃和37℃时, 尼麦角林与BSA 的结合常数分别为3.499×104 L·mol-1 4 -1 -1 和 5.213×10 L·mol , 结合位点数分别为 1.21 和 1.25. 由热力学参数焓变(ΔH=11.05 KJ ·mol )大于零和熵变(ΔS=74.87 -1 -1 J·mol ·K )大于零, 确定尼麦角林与 BSA 之间的作用力以疏水作用力为主. 结论: 尼麦角林与 BSA 通过疏水作用形成 复合物, 经静态猝灭机制引起BSA 内源性荧光猝灭. 关键词: 尼麦角林; 牛血清白蛋白; 荧光光谱法 中图分类号: R917 文献标识码: A 文章编号: 1003-4271(2014)04-0509-05 尼麦角林(Nicergoline ), 化学名为 10α- 甲氧基- 1, 6-二甲基麦角林-8β- 甲醇基-5-溴烟酸酯, 具有较强 的α 受体阻滞作用、扩张血管、抑制血小板聚集和抗血栓作用, 能加强脑部新陈代谢和神经递质转化, 增加血氧 和葡萄糖的摄取及利用, 临床上已成为阿尔茨海默症、血管性痴呆、脑血管疾病、周围血管疾病以及前庭中枢 [1-3] 性平衡障碍等多种疾病的经典用药 . 血浆中的白蛋白具有转运功能, 药物与白蛋白结合后不能跨膜转运, 起 到药物储库作用, 因此药物与白蛋白结合能力的高低, 直接影响其临床疗效, 但尼麦角林是否能与白蛋白相互 作用的研究尚未见报道. 本文选择了与人血白蛋白具有高度同源性的牛血清白蛋白(BSA), 采用荧光光谱法研 究尼麦角林与BSA 相互作用的特征, 该结果可为探讨尼麦角林在体内的转运、分配和代谢过程提供部分实验数 据和理论依据, 也为临床合理用药提供一定的参考. 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 CARY Eclipse荧光分光光度仪(美国, Varian公司), Unicam UV500 紫外分光光度仪(美国, Thermo公司), PHS-3D型PH计(上海智光仪器仪表有限公司 ).