10×realblot 快速转膜液10×realblot rapid transfer - biosharp.pdfVIP

10×RealBlot 快速转膜液 10×RealBlot Rapid Transfer buffer ● 产品组成： 货号 名称 规格 保存条件 BL609A 10×RealBlo 快速转膜液 500 ml RT 说明书 一份 ● 产品简介： 快速转膜液使用独特配方，能高效快速地将蛋白转移到印迹膜（PVDF 或硝纤膜）上。使用湿转 法（Tank blot ）或半干转法（Semi-dry blot ）方法，能在15-35 分钟内完成转膜过程。 快速和环保：快速转膜液不使用甲醇，减轻了对实验者和环境的伤害。 兼容性好：快速转膜液能兼容Laemmli 胶，预制胶，Bis-Tris 胶等多种凝胶。 转移效率高：快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率，有效解决了大小蛋白不 能在同一张膜上同时转移的问题。 ● 贮存： 18-26 ℃常温贮存，有效期一年。 ● 使用说明： 转膜前的准备： 5-6 张裁好的滤纸；裁好的转印膜；足够的 1×快速转移buffer 一 、湿转法 （Tank blot ）： 1 按照下表配制 1×快速转膜液： 1×快速转膜液配制量 100 ml 500 ml 1000 ml 10×快速转膜液 10 ml 50 ml 100 ml 无水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml 超纯水 70 ml 350 ml 700 ml 2 将滤纸和海绵浸泡在 1×快速转膜液中，完全浸湿。 3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2 分钟，去除胶表面的SDS ；随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。 注意：水中漂洗时间一定不能超过2 分钟，否则分子量较大的蛋白不能完全转移。 4 按照以下顺序做好转印三明治结构： 负极（阴极） 一块海绵 2mm 滤纸 凝胶 转印膜 1 mm 滤纸 一块海绵（根据三明治的厚度选择是否使用） 正极（阳极） 注意：① 要彻底清除三明治结构中的气泡，适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。 ② PVDF 膜使用前要用无水甲醇润湿30 秒。 ③ 三明治结构的制作不能太紧，也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的 话，可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。 5 将三明治结构放于转移槽中。 注：转移槽中可以不用 1×快速转膜液，可以用 1×TGS （Tris-Glycine-SDS）电泳缓冲液取代。三明治 结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。 二、 半干转 （Semi-dry blot ）： 1 按照下表配制 1×快速转膜液： 1×快速转膜液配制量 100 ml 500 ml 1000 ml 10×快速转膜液 10 ml 50 ml 100 ml 无水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml 超纯水 70 ml 350 ml 700 ml 2 将滤纸浸泡在 1×快速转膜液中，完全浸湿。 3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2 分钟，去除胶表