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温度对酶活性影响的实验探究与问题剖析 实验一 温度对唾液淀粉酶活性的影响 改变检测试剂:用本尼迪特试剂替代碘液做指示剂 实验二 温度对过氧化氢酶活性的影响 实验步骤: * * 仪器 冰箱、酒精灯、烧杯、温度计、 试管、铁架台、胶头滴管 试剂 淀粉溶液、碘溶液、本尼迪特试剂、 新鲜唾液淀粉酶、蒸馏水、 仪器与试剂 95℃ 37℃ 0℃ 恒温水浴温度 在各自温度下保温10分钟后,将2、4、6试管中的唾液淀粉酶溶液分别加入1、3、5试管中,振荡混合均匀,在各自温度下继续保温5分钟 1ml 1ml 1ml 新鲜唾液淀粉酶 3ml 3ml 3ml 2%淀粉溶液 6 5 4 3 2 1 试管 实验步骤: 5滴 5滴 5滴 碘液 5 3 1 试管 振荡混合均匀后,可以观察到以下实验现象: 100℃ 37℃ 蓝色 0℃ 无蓝色 无蓝色 问题1: 为何会出现“热水中淀粉、淀粉酶混合液遇碘后不显蓝色”这一怪现象? 作出假设: 假设一:唾液淀粉酶在95℃热水中仍然有很强的活性,淀粉被完全水解,因此溶液不变蓝色。 假设二:唾液淀粉酶95℃热水中因温度过高而失去活性,淀粉没有被水解,但因淀粉与碘形成蓝色络合物在95℃下不稳定, 所以无法观察到蓝色。 探究实验1: ①将上述实验中的95℃热水中淀粉和淀粉酶混合液冷却,可以观察到实验现象 出现蓝色 ②如果对其继续加热,可以观察到溶液蓝色消失 问题剖析1: 这主要取决于淀粉本身的结构。淀粉呈弯曲形式,并借分子内氢键卷曲成螺旋状。这时加入碘液,其中碘分子便钻入螺旋当中的空隙,并借助范德华力与淀粉联系在一起,从而形成包和物。这种包和物能比较均匀地吸收除蓝光以外的其它可见光(波长范围为400—750钠米),从而使淀粉变为深蓝色。由于在高温下,形成的包和物分解,故蓝色消失。 95℃ 37℃ 0℃ 恒温水浴温度 相应温度下保温10分钟后,将2、4、6试管中的唾液淀粉酶溶液分别加入1、3、5试管中,振荡混合均匀,放在各自温度下保温5分钟 1ml 1ml 1ml 新鲜唾液 3ml 3ml 3ml 2%淀粉溶液 6 5 4 3 2 1 试管 实验步骤: 2ml 2ml 2ml 本尼迪特试剂 5 3 1 试管 实验步骤: 摇匀,放在热水浴中煮2-3分钟,可以观察到如下现象: 2-3分钟后 0℃ 95℃ 37℃ 问题2: 0℃试管中的溶液为什么会有黄色出现? 作出假设: 假设一:在0 ℃条件下,唾液淀粉酶的活性没有被抑制,淀粉被水解了 假设二:唾液淀粉酶在0℃的时,活性被抑制了,但在水浴加热的过程中酶的活性被恢复了? 探究实验2: 2滴 碘液 1ml 唾液淀粉酶 3ml 淀粉 在0℃条件下,将唾液淀粉酶与淀粉溶液分开保温10分钟后,混合均匀,放置在0℃条件下5分钟后滴加碘液,观察实验现象。 可以观察到: 出现蓝色 问题剖析2: 唾液淀粉酶的活性在0℃的条件下被抑制了,在滴加本尼迪特试剂后,水浴加热,被抑制的唾液淀粉酶的活性被恢复了。所以,在研究温度对唾液淀粉酶影响的实验中,不能用本尼迪特试剂作检测剂。 例:下列哪组实验材料最不适合探究不同温度对酶活性影响的实验? A.过氧化氢和过氧化氢酶 B.淀粉和淀粉酶 C.蛋白质和蛋白酶 D.麦芽糖和麦芽糖酶 问题来源: 仪器 冰箱、酒精灯、烧杯、温度计、 试管、铁架台、胶头滴管 试剂 过氧化氢溶液、鲜肝匀浆 仪器与试剂 相应温度下保温10分钟后,将2、4、6试管中的鲜肝匀浆分别加到1、3、5试管中,振荡混合均匀 65℃ 37℃ 0℃ 恒温水浴温度 5滴 5滴 5滴 鲜肝匀浆 2ml 2ml 2ml 过氧化氢溶液 6 5 4 3 2 1 试管 可以观察到如下现象: 0℃ 65℃ 37℃ 出现大量气泡 出现大量气泡 比0℃更快更多 无大量气泡产生 问题3: 在65℃水浴中的试管,加入过氧化氢酶后为什么没有大量气泡产生?
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