第3章.鱼类人工繁殖生物学基础.ppt

六、生殖方式 1、卵生 ：体外受精、体外发育 2、卵胎生：体内受精，体内发育，卵黄营养 3、胎生（假胎生）：体内受精，体内发育， 卵黄+血液 六、精子和卵子的生物学 （一）精子的生物学 1、活力和寿命 § 精子在精液中是不动的，遇水便开始激烈运动（20s- 30s），不久便死亡。 § 鲢、草鱼精子在水中的寿命一般为50s-60s，鲤精子寿命 略长一些，中华鲟精子寿命更长（5-40min）。精子在水 中活动时，大部分能量消耗在调节渗透压方面，用于运动 方面的能量较少。 2、影响鱼类精子活动和寿命的因素 （1）盐度 （渗透压） 0 7.5 18.3 17.3 4.0 0 平鲷精子涡动时间 （min） 7.5 9.0 14.5 15.0 3.3 1.0 黄鳍鲷精子涡动时 间（min） 40 30 22 21 15 10 盐度 黄鳍鲷平鲷精子在不同盐度水中涡动的时间 184 236 247 161 143 102 85 97 平均寿命 （s） 7 6 5 4 3 2 1 0 NaCl 溶液 （g/L） 鲥精子在不同NaCl溶液中的寿命 (2)水温 § 各种鱼类精子都要求一定适宜温度，四大家鱼的精 子寿命在水温２２℃时最长（５０s），３０℃时 为３０s。水温过高或过低都不利于精子成活。真 鲷精子的活力在18.8℃时最高，黑鲷精子在20.6℃ 时活力最好。 § 鱼类精液中精子寿命随温度下降而延长：鲤精液中 精子寿命在26-29℃、0-2℃条件下分别为６-8h和 15h，故低温保存精液可取得好的效果。 77.0 80.0 98.0 92.0 90.0 83.0 68.0 60.0 精子活力 10.1 9.07 8.01 7.94 6.02 5.07 3.98 3.04 pH值 弹凃 鱼 56.0 78.0 90.0 59.0 54.0 35.0 精子活力 10.0 9.17 8.08 7.11 6.25 5.06 pH值 真鲷 85.6 94.2 96.0 88.0 98.5 81.0 精子活力 10.0 8.95 8.07 7.04 5.93 5.07 pH值 黑鲷 99.7 97.6 99.0 95.8 97.4 99.3 97.4 93.5 精子活力 10.4 9.42 8.92 8.27 7.86 6.94 6.12 4.32 pH值 花鲈 50 90 90 90 90 70 60 50 30 0 精子活力 9.0 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.0 3.0 pH值 牙鲆 (3)PH值：鱼类精子在弱碱性水中活动力最强，寿命最长 (4)氧和二氧化碳 § 无氧会抑制精子的呼吸、活动和代谢作用，所以，精子在 缺氧条件下比在有氧条件下存活的时间长。二氧化碳对精 子有抑制作用。干法受精就是利用精子这一生理学特点， 使精子在无水缺氧条件下均匀分布于卵表面，延长 寿命， 当加水后精子便强烈运动钻进卵中，以提高受精率。 § 5、光线 紫外线和红外线对精子有危害作用，因此，不要 让日光直接照射精液，直射的阳光对精子有致死影响。鲤 精子经阳光直接照射10～15min后，有80%～90%死亡。但白 天的散射光对精子无不良影响。 3、精液的保存与延寿剂、抗冻剂 § 鱼类精液的保存包括低温保存和超低温保存两种：前者指将 精液保存在10℃～15℃（一般为0℃左右）的温度中，后者指 保存在-196℃的液氮生物容器中，受精前需解冻。 § 延寿剂指在精液保存过程中有利于延长精子寿命的物质，包 括精液稀释剂、抗生素、氧气、抗冻剂等。精液中加入稀释 剂后，可延长保存时间，便于受精操作，控制保存效果。 § 不同鱼类精液的最适稀释剂有所不同，但它们均以鱼类生理 盐水为基础，模拟精液的组成成分，添加各种营养物质和稳 定剂。稀释液的pH值应与鱼类精液的pH值接近，一般在6.5～ 7.5之间；渗透压在300毫渗左右。 § 一般认为，在0℃以上保存精液不需加抗冻剂，但只能保 存几天，最多十几天。在0℃以下或超低温（-196℃） 下，精液虽可长期保存，但冷冻和解冻过程中的一系列理 化变化，会对精子造成损伤。因此，长期保存精液就必须 添加防冻剂。 § 常用的鱼类精液抗冻剂有二甲亚砜（DMSO）、乙二醇或甘 油等，另外卵黄、蜂蜜、葡萄糖和牛奶等也有一定的抗冻 作用。 1:3 1:1 1:1 1:2 稀释 比例 1.00 蜂蜜 50 1.00 15.0 葡萄糖 0.30 NaH PO 2 4 0.20 1.00 0.20 0.20 NaHCO 3 0.35 0.10 2.5 0.35 MgCl 2 0.60 0.23 2.5 0.25