细胞工程学 第8章.ppt

4) 有时某亲本已经丧失的功能又重新出现； 5) 有时还出现双亲都没有的特征； 6）在培养过程中由于结构基因或调节基因的丢失，产生各种表现型。 （3）原来已经丧失的功能可以被再激活 细胞在分化过程中不同程度地消失了合成DNA和RNA的能力，在融合细胞中能重新被激活，但这取决于参加融合的二个亲本是否有一个具有这种能力。 （4）融合细胞中双亲特征的表达不只限于基因的产物，也包括细胞的基础代谢，还有如免疫球蛋白和干扰素的合成和分泌功能也能在融合细胞中保留下来。 （5）细胞浆因子导入融合细胞能相互影响 例如分裂中期（M），细胞浆中有一种促使染色体浓缩的因子，当M期细胞与G1期细胞、S期、G2期细胞融合时，它能促使这些间期细胞中的染色质发生早熟浓缩。 融合细胞的这一特征可以用它来进行细胞周期的分析以及间期染色质结构的研究。 （6）融合细胞中两个亲本具有遗传互补作用 这一原理现已应用于各种营养缺陷型，不同温度敏感型及不同酶缺陷的杂交细胞的选择工作中。但更重要的是利用这一特点来进行基因互补分析，研究基因之间和基因之内的互补关系，以便进一步了解基因及基因组的组成。 第五节 细胞融合技术的应用 1、利用基因定位绘制人类基因图  (1) 小鼠×人杂交细胞，人染色体优先丢失，而只留下一条或少数几条人的染色体； (2) 染色体分带技术可以把人与鼠的染色体区分开，而且能区别每一根人的染色体； (3) 电泳技术可以鉴别不同种动物的蛋白和酶。 2、利用杂交细胞生产活性物质 单克隆抗体工业的兴起就是利用B淋巴细胞被特异的抗原刺激后能应答而分泌特异的抗体的特点同骨髓瘤细胞的长命不死的特点两者融而为一。 推论： 可能利用胰脏细胞生产胰岛素，利用甲状腺细胞生产甲状腺素，利用垂体细胞生产生长激素、各种促性腺激素、催乳素以及各种神经激素等。还可以利用麝香腺细胞生产麝香。 3、生产实践方面的应用 （1）在生物医药上的应用 如：单克隆抗体的生产 （2）在微生物构建新菌株方面的应用 原生质体融合也成了微生物育种的重要手段。乳糖发酵短杆菌和黄色短杆菌是两种重要的氨基酸生产菌，黄色短杆菌是赖氨酸高产菌株，但生长缓慢，发酵周期长，生产中易染菌，将它与生长快的乳糖发酵短杆菌融合，得到了新的赖氨酸生产菌，提高了对葡萄糖的转化率，发酵周期缩短4%。 对酱油酿制来说，曲霉的蛋白酶对谷氨酸（味鲜）的产量有很大的影响。过去在改良和培育酱油曲霉菌种时，其主要目的是增加产酶能力，但由于产蛋白酶高的菌株产谷酰胺酶的能力低，而产谷酰胺酶高的菌株产蛋白酶的能力低。人们把高产谷酰胺酶和蛋白酶的两株菌原生质体融合，获得双高产的优良菌种。 用原生质体融合方法培育具有多种杀害虫能力的新菌株也是重要的研究热点。如利用苏云金杆菌和灭蚊球孢菌组装成既能灭蚊又能杀螟的新菌株，在育种中有更多的实际应用。 （3）在水产动物遗传育种上的应用 科学家把大鳞副泥鳅同鳗尾泥鳅杂交培育了融合鱼。 将鲤鱼囊胚细胞与红鲫鱼卵融合，培育了融合鱼苗。这些融合鱼各具两对触须，形态类似鲤鱼。 （4）在植物新品种育种上的应用 萝卜和甘蓝、粉蓝烟草和郎氏烟草、番茄和马铃薯、烟草和大豆、甘蔗和高粱、芥菜和紫芸苦等，这些杂种植物采用有性杂交的方法是难以得到的。 我国科学家已培育出普通烟草与黄花烟草、普通烟草与粉蓝烟草、烟草与矮牵牛、烟草与天仙子等种间和属间体细胞杂种植株。 细胞融合体细胞杂交烟草 湖北省农科院生物技术研究所运用细胞融合与植物组培技术，培育出多个优质蔬菜和花卉品种。其中水果型黄瓜S－609，清香可口，亩产量高。 （5）在发酵工程中的应用 日本科学家把两个不同种类的酵母强行融合起来，并使融合成的细胞繁殖，制成新的酵母。这一技术为今后改良酵母开辟了新途径，把最尖端的生物工程中的细胞融合办法应用到传统的酿酒技术中，成为守旧的酿造技术体系革新的一个起点。 体细胞融合的技术，如今已在动物间实现了小鼠和田鼠，小鼠和 小鸡，甚至于小鼠和人等许多远 缘和超远缘的体细胞杂交。 利用细胞杂交技术来制备工程细胞生产活性物质的优点： （1）细胞融合率比较高； （2）操作也比基因工程简单； （3）所产生的蛋白都是已糖基化了的天然蛋白； （4）动物细胞大批量生产技术的发展和改进与细胞内高效表达体系的建立，为动物细胞工程的蛋白生产开辟新途径。 第六节 细胞融合技术的进展与展望 1998年11月，美国有研究人员首次将人的面颊细胞与牛的卵母细胞结合，克隆出胚胎细胞。 2000年10月，澳大利亚和美国的