第八章 基因扩增荧光定量检测记录表.docVIP

基因扩增荧光定量检测记录表 实验日期： 检测项目： Lightcycle保存文件名： 使用说明： 严格按单一流向进行实验，即试剂准备区（1区）→样本处理区（2区）→扩增分析区（3区），严禁逆向。本记录表的流向亦遵循此流程； 各项目执行后在相应项目前的方框内打√； 实验室内温度为15℃—30℃为合格范围；湿度不高于80%。 实验后对实验室的清洁与消毒方法参见“PCR实验室清洁程序” ，实验后次日关闭通风设备和移动紫外灯； 实验结束后，将标本的检测结果登记至标本记录本上以备查询。本记录表保存在归档文件夹中，存放于分子生物学实验室文件柜中，保存2年； Lightcycle扩增仪中结果保存于D盘对应实验日期的文件夹中，如2004年4月的结果保存于“D:\2004\04\”中，每月底将当月资料备份于软盘中，保存2年。 前期准备 试剂在有效期内 0.2%含氯消毒液在使用有效期内（30天） 加样器吸头灭菌是否在有效期内。 器具及仪器在校准有效期内（校准之日起1年） 操作者： 试剂准备区（1区） ①实验前： □打开通风设备 □0.2%含氯消毒液擦拭实验台面 □记录室内温 湿度 ②试剂及器具：检测项目 试剂厂家： 批号 有效期 ③试剂配置记录： □ 按基因扩增实验室标准操作程序配制1%含氯消毒液 毫升； □ 按基因扩增实验室标准操作程序配制4％NaOH溶液 毫升； □ 按基因扩增实验室标准操作程序配制0.1%焦磷酸二乙酯 毫升； □ 反应混合液 共配 人份， ul 主反应液 ul Taq ul UNG酶。 □ 70%（75%）乙醇 ml 无水乙醇， ml DEPC处理水。 清点试剂存量 人份 ④实验后：□填写记录 □清洁地面 □消毒实验台面及器具 □打开紫外灯 □按标准操作程序处理废弃物 操作者： 样本处理区（2区） ①实验前： □0.2%含氯消毒液擦拭实验台面 □记录室内温 湿度 ②室内质控物来源及浓度：来源 质控浓度 扩增位置 ③标本标识及扩增位置： 1 9 17 25 2 10 18 26 3 11 19 27 4 12 20 28 5 13 21 29 6 14 22 30 7 15 23 31 8 16 24 32 ④核酸提取步骤： □ 按基因扩增实验室标准操作程序对标本进行核酸提取及定量标准品稀释 □ 核实金属浴与水浴温度 □按基因扩增实验室标准操作程序对标本进行逆转录 □将提取核酸加样至毛细管并加反应试剂 ⑤低温离心机：制冷：□正常□不正常 离心：□正常□不正常 异常情况处理： ⑥实验后：□填写记录 □清洁地面 □消毒实验台面及器具 □打开紫外灯 □按标准操作程序处理废弃物 操作者： 扩增分析区（3区） ①实验前： □打开通风设备 □0.2%含氯消毒液擦拭实验台面 □记录室内温 湿度 ②Lightcycle扩增仪操作：□开机后自检正常 □按标准操作程序执行各操作步骤并设定扩增参数 □将标本标识填写到扩增仪上相应位置 仪器状态：□正常 □不正常 ③测试所得标准值： Slope值： Intercept值： r值： ④室内质控结果：结果： □填写室内质控记录、描质控图 结果是否失控：□否 □是