怀山药对5-脂氧合酶抑制作用的初步研究.pdfVIP

Preliminary study on the 5-lipoxidase inhibitory activities of Chinese yam (Dioscorea opposita Thunb.) A Dissertation Submitted to the GraduateSchool of HenanUniversity in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Science By Li Haitao Supervisor: Prof. Liu Xiuhua Date: May, 2015 万方数据 万方数据 万方数据 万方数据 摘要 5- 脂氧合酶(5-LOX) 是产生炎症介质的关键酶之一，本文以怀山药(Dioscorea opposita Thunb.)为研究对象，着重研究了其对5-LOX 活性的影响，主要内容如下： 1. 怀山药提取物对5-LOX 活性抑制作用的研究 采用 Fe2+氧化 — 二甲酚橙法评价待测物对 5-LOX 体外抑制效果，确定的实验条 件为：温度 25 ℃、反应介质为 Tris-HCl 缓冲溶液、酶浓度 230 U/mL、亚油酸浓度 7 μmol/L 、FOX 试剂和酶反应溶液体积比为 1:1、显色时间为 10 min，并分别使用H O 2 2 和 NDGA 对体外筛选模型进行验证。考察了怀山药提取物对 5-LOX 活性的抑制作 用，结果显示，乙酸乙酯相提取物具有相对较好的抑制活性，IC50=25.00 mg/L 。研究 结果为进一步追踪怀山药抗炎活性部位及研究其作用的途径和机制提供参考。 2. 怀山药中部分化合物及其类似物对5-LOX 活性抑制作用的研究 从山药中制备出了山药素 I、β-谷甾醇、尿囊素等几个在其他抗炎模型下具有抗炎 功效的化合物，并考察了它们及山药素 V ，山药素 IV ，两个山药素 IV 类似物对 5- LOX 活性的抑制作用，结果显示，山药素 I、β-谷甾醇、尿囊素没有体外 5-LOX 抑制 功能，山药素IV 及两个山药素IV 类似物有 5-LOX 抑制作用，但抑制作用较弱且相差 不大（浓度为1 mmol/L 时抑制率均小于35% ），6,7-二羟基-2,4-二甲氧基菲具有相对较 好的抑制作用，IC50=0.30 mmol/L 。研究结果为继续寻找怀山药中 5-LOX 抑制成分提 供了参考。 关键词：怀山药，5-LOX ，抑制 I 万方数据 万方数据 ABSTRACT 5-lipoxidase (5-LOX) is one of the key enzymes in inflammation.Chinese yam(Dioscorea opposita Thunb.) as a medical and edible plant with various activities and functi