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* 邻二氮菲分光光度法测铁 一、实验目的 学习分光光度法主要测量条件的选择。 掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法。 了解721型（或其他型号）分光光度计的构 造和学习使用方法。 二、实验原理 分光光度法测定物质含量时的主要测量条件是通过吸收曲线的测绘而选择的入射波长。 邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂，反应式如下： 配合物 lgK稳 =21.3，摩尔吸光系数?(510)=1.1×104 测定时pH=5较适宜。酸度高时，反应速度慢，酸度太低，亚铁离子易水解，影响测定。 三、仪器与试剂 仪器：721（或其他型号）型分光光度计、容量瓶、吸量管。 100mg/ml铁标准溶液、10 mg/ml铁标准溶液、10%盐酸羟胺（临时配置）、0.1%邻二氮杂菲溶液（新配置）、1mol/L醋酸钠溶液、铁未知液。 四、实验操作步骤 1．10 ug/mL铁标准使用液和水样的配制 用移液管移取100 ug/mL的铁标准储备液10.00 mL，置于100mL容量瓶中，加入2 mL 6 mol∕L HCl，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 2．标准系列的配制 用刻度移液管分别移取上一步骤配制的铁标准使用溶液（10ug/mL）：0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL依次放入7只50mL容量瓶中，分别加入10%盐酸羟胺溶液1.0 mL，稍摇动，再加入0.1%邻二氮菲溶液2.0 mL及Hac-NaAc缓冲溶液5 mL，稀释至刻度，充分摇匀。 四、实验操作步骤 3.测量条件实验——吸收曲线的测绘： 取上述标准系列中铁标准溶液用量为6.0 mL的显色溶液，在分光光度计上，从波长440nm开始，以含铁标准溶液为0.0 mL的试液为参比，每隔20nm测定一次吸光度A值。当临近最大吸收波长附近时应每间隔5～10nm测定一次A值。 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标制出吸收曲线，从吸收曲线上确定最大吸收波长（? max ). A ?? 4.铁含量的测定 标准曲线的绘制： 10 mg/ml铁标准溶液 参比 2 ml 3 ml 4 ml 5 ml 6 ml 以不加铁标准溶液的试液为参比液，上一步骤所选择的最大吸收波长为测定波长，依次测定标准系列中各溶液的吸光度A值。 以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。 5．水样微量铁的测定 准确移取5～10mL（以所测吸光度在标准曲线范围内为宜）未知试样溶液，按同样步骤和方法测定吸光度A值。在标准曲线上查出所含铁的浓度，计算水样中铁的含量。 五、结果与数据处理 1.吸收曲线的绘制： 将各波长及相应的吸光度列出，用坐标纸绘制吸收曲线。吸光度最大时相应的波长即为最大吸收波长，并在图上标出。 A ? ? max