新型荧光试剂1，5-二（4，6-二氯三嗪）．氨基萘与酪氨酸相互作用.pdfVIP

第35卷 分析化学(FENXI HUAXUE) 研究简报 第12期 2007年12月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1772—1775 …‘‘““‘…‘‘…‘‘…‘‘…‘‘…‘‘…‘； ：研究简报： ：…．．…．．…．．…．．…．．…．．…．．．．．．： 新型荧光试剂1，5．二(4，6．二氯三嗪)．氨基萘与 酪氨酸相互作用 魏薇 王洪鉴 江崇球 石敬民 (山东师范大学化学化工与材料科学学院，济南250014) 摘 要 合成了一种新型三嗪荧光探针1，5．二(4，6-二氯三嗪)．氨基萘并利用元素分析、IR和核磁共振谱进 行了表征。在pH=12．0的柠檬酸钠-NaOH缓冲溶液中，与酪氨酸在35℃下反应30 min后，A…／A = 400 nm／465 am处，1，5-~(4，6-二氯三嗪)-氨基萘与酪氨酸反应使体系的荧光强度增强，且增强的荧光强度 与酪氨酸的浓度成正比，依此建立了一种测定酪氨酸的新方法。测定的线性范围是1．1×10～一1．1× 10～mol／L，检出限为6．8×10一mol／L。该方法成功用于测定人尿和血清样品中的酪氨酸。 关键词 荧光光度法，酪氨酸，1，5-~(4，6-二氯三嗪)-氨基萘 1 引 言 酪氨酸(Tyr)是一种常见的氨基酸，可以作为合成肾上腺素、儿茶酚胺、多巴胺和黑色素的前体。它 在人体内的含量稳定与否直接反映人体的健康状况。如果人体酪氨酸水平不正常就会出现心情低落或 者其他情绪异常等症状，还可能引起帕金森病…。酪氨酸含量水平也是临床检验项目之一。目前测定 酪氨酸的方法有催化光度法 ]、现场光化学荧光法 J、毛细管电泳 J、酶法 J、电化学方法 、化学发光 法 和色谱法 ．9]。三聚氯氰具有特殊的反应性能，Ma等¨ H 利用它合成了几种光学标记探针，用于 测定甲胺、过氧化氢、苯酚、雌(性)激素等。但这些光学标记探针中只含有一个三聚氯氰分子和一个能 与被测分子反应的活性氯原子。本研究利用1，5一二氨基萘中具有的一个大共轭体系萘环和两个供电 子基氨基，通过简单的一步反应合成了一种含有两个三聚氯氰分子和两个活性氯原子的新型荧光探针 1，5-~(4，6．二氯三嗪)．氨基萘 (DTAN)，使新荧光探针取代氢的能力进一步加强，提高了反应的灵敏 度。新荧光探针DTAN中含有两个吸电子的三嗪环和两个活性氯原子，能与两个酪氨酸分子结合。当 两个酪氨酸分子取代DTAN中的两个活性氯原子后生成了一种新的化合物，从而改变了三嗪环的吸电 子特性，抑制了分子内光诱导电荷转移过程，导致荧光强度的变化。实验结果表明，DTAN的荧光强度在 加入酪氨酸以后得到极大增强，体系增强的荧光强度和酪氨酸的浓度成线性关系，依此建立一种测定酪氨 酸新荧光光度法，新方法选择性好、操作简便迅速并能成功地应用于i贝0定人尿和血清样品中的酪氨酸。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 RF．540型荧光分光光度计(13本岛津公司)；Avance DRX-300型核磁共振仪(瑞士Bruker公司)； M 850型质谱仪(美国Finnigan公司)；240C型元素分析仪(美国Perkin-Elmer公司)；Frs-40型红外光 谱仪(美国Bio-Rad公司)。 ‘ 三聚氯氰和1，5．二氨基萘(Fluka试剂公司)；1，5-~(4，6．二氯三嗪)．氨基萘 (DTAN，自合成)；无 水丙酮溶液：1．0×10～moL／L，保存于0～4~C干冷环境中，一个月内没有明显地观察到DTAN水解；酪 2007-03-23收稿；2007-06-28接受 本文系国家自然科学基金(No资助 E—mail：jiangchongqiu@sdnu．edu．cn 第12期 魏薇等：新型荧光试剂1，5-二(4，6-二氯三嗪)一氨基萘与酪氨酸相互作用的研究与应用 1773 氨酸储备液(上海禽蛋二厂)1．1×10～mol／L；pH：12．0的0．1 mol／L柠檬酸钠一NaOH缓冲溶液。 2．2 DTAN的合成 首先将0．326 g(2 mmo|)1，5一二氨基萘(compound 2)和