酶联免疫吸附试验..pptVIP

;ELISA的基本原理;④用洗涤的方法去除未结合的酶标抗原（或抗体），最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 ⑤加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物。 ⑥产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来定性或定量分析。;;ELISA的类型;一、双抗体夹心法;二、间接法测抗体 ;三、酶标抗原竞争法;间接ELISA方法的建立;ELISA操作步骤;3、封闭：各孔加入封闭液200ul，37℃作用1h； 4、洗涤； 5、加被检血清：将血清样品稀释至最佳浓度，每孔100μL，每个样本两孔，每块板同时设阴性、阳性及空白对照各两孔，37℃作用30min； 6、洗涤； ;7、?酶标二抗：稀释HRP标记羊抗猪IgG，每孔100μL，37℃作用30min； 8、洗涤； 9、显色：加新鲜配制的TMB底物液每孔100μL，室温避光作用15min； 10、加终止液：加50μL?2mol/L硫酸； 11、读数：用酶标仪检测OD450值。; 血清学方法有很多种, 如传统的琼脂扩散( A G ID ) 、 血凝抑制( H A / H I ) 、 乳胶凝集、 试管凝集、补体结合等方法，但这些方法不是最合适的检测方法。EILSA技术与其有着不同的特点： 1、灵敏度高。ELI SA是通过酶促反应放大检测信号, 从而提高检测的灵敏度, 其检测限可达 ng 甚至pg