低成本PCR微反应器阵列的温度测量与控制技术-中国工程科学.PDF

２００７ 年７ 月 中国工程科学 Jul．２００７ 第９ 卷第７ 期 Engineering Science Vol畅９ No畅７ 研究报告 低成本 PCR 微反应器阵列的温度测量与控制技术 李现明， 张玉林， 李建田 （山东大学控制科学与工程学院， 济南　 ２５００６１） ［摘要］ 　 设计了一种用于聚合酶链式反应的低成本微反应器， 其内部无微加热器、 微传感器。 针对这种低成 本的微反应器， 提出了一种温度测量与控制方案， 其特点是将各反应器温度的集中控制与分散控制有机结合， 能够同时完成上百只微反应器快速、 准确的温度循环。 重点阐述了温度传感器负荷效应的提取与补偿、 动态误 差补偿、 微反应器温度间接测量误差评定、 微反应器温度串级控制策略。 ［关键词］ 　 微反应器； 测量； 控制； 聚合酶链式反应 ［中图分类号］ TP２７７　 　 ［文献标识码］ A　 　 ［文章编号］ １００９－１７４２ （２００７） ０７－００７６－０６ 　 　 聚合酶链式反应 （polymerase chain reaction， 片体积微小、 质量极小、 比表面积大， 可从本质上 PCR） 是一种体外模拟自然 DNA 复制过程的核酸 弥补台式 PCR 扩增仪的不足， 达到升降温速率高 扩增技术， 它能把痕量的遗传物质迅速扩增百万 （可达每秒十几度） 、 循环周期短、 温控精度高和动 倍， 使原来本无法进行的各种分析检测项目得以实 态重复性好的目的。 PCR 芯片的另一个突出优点是 ［１］ 可节省珍贵样品， 所需样品仅为数微升至数十微 施 。 目前进行聚合酶链式反应所通用的设备是台 ［２］ 升。 但是， PCR 芯片在进军市场的过程中却遇到了 式PCR 扩增仪， 有多种具体型号 。 它们一般配 置一个分子生物学专用的盘子， 该盘子上有４８ 或 较大的困难， 至今未获得大规模推广应用。 造成这 ９６ 个槽， 槽内用于放置 PCR 反应管， 可同时对 ４８ 种情况的主要原因之一是 PCR 芯片成本居高不下， ～９６ 个样品进行扩增。 标准的 PCR 反应管为玻璃 能否有效降低芯片成本成为这种新技术推广应用的 微量管， 容积有 ０畅２ mL， ０畅５ mL 等。 由于温度的 瓶颈。 降低成本的渠道之一是采用价格相对较低的 大惯性、 大滞后特点， 特别是由于微量管较厚的管 材料来制作芯片， 例如采用某些高分子聚合物材料 壁和较小的比表面积， 为使样品获得均匀的、 数值 作为芯片的基片， 许多学者对此进行了有益的探 符合要求的反应温度， 典型的升降温速率为 １ 索。 但由于芯片内部含有加热器、 传感器， 存在固 ℃桙s， 致使温度循环中升温降温过渡过程所占用的 有的结构复杂性， 其成本的降低是有限的。 作者采 时间大大超过反应本身所需时间， 进行一次 PCR 用结构简化的PCR 芯片［４ ，５］ ， 芯片内部仅含微反应 反应所需时间一般为１ h 至数小时。 在满足样品温 槽而不含加热器、 传感器。 由于不再需要集成加热 度均匀性要求的前提下， 提高升降温速率， 对缩短 器、 传感器所使用的设备、 工艺、 材料， 故芯片生 PCR 反应的时间、 提高设备的工作效率， 具有重要 产的初始投资降低、 成品率提高、 成本降低； 又由 意义。 于芯片结构简单， 故其可靠性也相应提高。 由于芯 随着微机电系统技术的兴起， 一类微反应器 片不含加热器、 传感器， 因此检