GFP蛋白的表达、分离与纯化.pptVIP

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  • 2017-07-16 发布于四川
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如何留样能在一张SDS胶图中(10-12 wells)体现诱导的效果、(NH4)2SO4粗分离效果、疏水层析纯化效果、离子交换层析纯化效果、凝胶过滤层析纯化效果? 王媛媛 yywangd@课堂提问——每人2-3个问题;权重:30% 总结报告——PPT,5人一组,10分钟;权重:30% 实验报告——权重:40% 要求:标准的论文格式:中、英文标题和摘要;前言;材料与方法;结果;讨论;参考文献。 PPT:照片、视频 展示个性,潮! Day 0: 准备实验材料 Day 1: GFP表达质粒的提取;Top 10感受态细胞的制备;GFP表达质粒转化Top 10。 Day 2: GFP表达菌株扩大培养;GFP的诱导表达。 Day 3: 表达菌株的收集、破碎;硫酸铵沉淀所用浓度的确定;硫酸铵沉淀GFP;疏水层析。 Day 4: 离子交换层析;透析;凝胶过滤层析。 Day 5: SDS;染色;脱色,观察结果。 记得带照相机 ! 鸣谢: 生命学院生物科学104班 邹兵 周嘉 赵琅 李运彰 汪源 原核:E.coli 真核:Yeast Insect mammals Vector: pET series, pGEX series, gateway series, pMAL, p

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