2018届基因工程的操作程序概要1.ppt

(3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？_________。 (4)为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为________。 (5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。 ①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到________种DNA片段。 ②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到________种DNA片段。 【答案】　(1)耐高温　(2)引物对B　(3)否　(4)农杆菌　(5)①2　②1 4.β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？ （1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA)。 （2）将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一个表达载体。 （3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。 （4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。 类别 项目 ? 复制 ? 转录 场所 特点 模板 原料 酶 能量 碱基 配对 产物 细胞核 只有DNA的一条链 四种核糖核苷酸 RNA聚合酶 ATP A-U C-G T-A G-C 细胞核 DNA的两条链 四种脱氧核苷酸 解旋酶、DNA聚合酶 ATP A-T C-G T-A G-C 两个双链DNA分子 一条单链mRNA 边解旋边复制， 半保留复制 边解旋边转录 (2010年北京海淀区抽查)下图是含某目的基因的DNA片段，据图回答下列问题。 (1)根据图示可知，若用EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶切割，则此DNA片段可有_____个限制酶切割位点，切割后共有____种____个切割末端。 (2)EcoRⅠ限制酶切割后形成的末端是　　　　末端，在图中用笔标出切割部位。 (3)如果要将用EcoRⅠ限制酶切割形成的目的基因片段导入受体细胞，一般需要_____作载体。其应具备的特点有：_____、___、___。 (4)E·coli DNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中____(填字母)部位的化学键。 【答案】　(1)3　2　6(不计算原有的) (2)黏性 (3)质粒　至少有一个切割位点　能自我复制　含标记基因 (4)X (2009年江苏高考题)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。 (1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。 (2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。 (3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的________。 (4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T－DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中___对T－DNA的降解。 (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞________。 (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的____基因频率的增长速率。 【解析】　本题重点考查转基因技术的相关知识，需特别注意基因工程的步骤、DNA的复制、基因工程的操作工具等知识。本题需特别注意图示过程，从中获取有效信息，然后结合课本知识即可正确解答。 【答案】　(1)4　(2)2　1　(3)复制　(4)DNA水解酶 (5)表面无相应的特异性受体　(6)抗性 1．(2009年浙江高考题)下列关于基因工程的叙述，错误的是(　　) A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 【解析】　基因工程中目的基因来源于自然界中的含有目的性状的一切生物，可以是动物、植物，也可以是真菌、