第十一章 Nucleofector核酸转染仪.docVIP

Nucleofector? 核酸转染仪 Amaxa公司简介Amaxa公司成立于1998年，是德国一只处于快速发展中的生物技术团队，他们致力于一种高效率、非病毒基因转染技术——Nucleofector? 的开发。在Nucleofector? 技术和成功融资的基础上，Amaxa公司从最初的两个人迅速发展到现在的80多位技术人员的队伍，并迅速成为非病毒基因转染技术领域里最主要的公司之一。Nucleofector? 核酸转染仪Nucleofector? 核酸转染仪是将传统地电穿孔技术和专用地转染试剂结合起来的产物，针对不同的细胞类型，采用一套最理想的转染试剂和转染程序，以达到最理想的转染效率。Nucleofector? 核酸转染仪特别适用于转染原代细胞和难以转染的细胞系，如T细胞及PC-12细胞系等。Nucleofector? 技术是独一无二的，因为它可以直接将DNA转染到细胞核内，因此实现了因受到细胞分裂限制而一直困扰人们的原代细胞的高效率转染。在Nucleofector? 核酸转染仪的帮助下，您可以在肿瘤研究、免疫学、组织工程学及心血管疾病研究领域中轻而易举地获得大于90％的高效率基因转染率。 Nucleofector? 技术由两部分组成☆Nucleofector? Solution转染溶液转染过程中，细胞首先悬浮在转染试剂中，选择相应地过程，仅需几秒钟，转染结束，将细胞转移到培养基中培养、观察。针对不同的转染细胞都有相应地转染试剂，配合相应地Amaxa转染仪过程，使DNA直接转入细胞核内，转染效率高，易操作，实验周期短☆Nucleofector? Device转染仪Nucleofector? 转染仪的原理使电穿孔技术，但它有一般的电穿孔无法比拟地优点，它具有独特地电子参数，每一套电子参数是作为一种程序去适应不同的细胞类型。由于电子参数是预先精心设计好的，因此操作者不用进行电子参数的优化、转染条件的摸索等繁琐的工作，您只需按动按钮选用规定的程序即可。Nucleofector? 核酸转染仪的整个操作过程只需四步，非常简单、高效。特点☆ 转染效率高因为DNA是直接转入细胞核中，很容易得到高转染效率。如大多数细胞系核原代细胞地转染效率位50％-70％；某些原代细胞，如人表皮纤维原细胞转染效率超过90％。☆ 转染速度快由于基因转染不依赖细胞分裂，在大多数细胞类型转染地基因2-4小时就能检测表达，这大大缩短了传统转染方法必须24-48小时才能表达地时间。这样加快了实验进程，这个实验只需一天就能完成。☆ 操作简单方便Nucleofector? 转染技术操作不到1小时就能完成。应用免疫学/血液学Amaxa公司的细胞转染仪不仅可以转染原代T、B细胞，而且对免疫细胞系如，K562，JURKAT或白血病细胞如CLL或AML等细胞都能进行高效率转染。单核细胞、巨噬细胞或郎格罕氏细胞、单核细胞派生或CD34阳性细胞派生的树突状细胞的实验方案也已开发出来。Amaxa公司现在可以提供一下转染试剂盒：Human B Cells、Human T Cells、Human CD34 Cells、K562 CellsDMSZ）、JURKAT Cells。心血管研究过去，繁琐的优化步骤和缺乏重复性严重地阻碍了心血管转染地的研究，现在，借助于Nucleofector? 技术，已能成功进行成体干细胞、CD34阳性细胞、CD34阳性细胞派生的干细胞和间叶干细胞（MSC）等的转染。近来，关于这些干细胞分化成内皮细胞或心肌细胞以及他们在适宜组织的定位的文献已经发表，这些资料显示了Nucleofector? 技术在干细胞治疗心血管病的潜力。Amaxa公司现在可以提供一下转染试剂盒：HUVECs（Human Umbilical Vein Endothelial Cell）、HCAECs、Human AoSMCs、Human CD34＋ Cells。皮肤医学和组织工程Nucleofector? 转染技术对于人的皮肤纤维原细胞或人的表皮黑色素细胞获得高转染效率，为皮肤学在基础和临床研究提供了很多新的机会，如研究纤维症和伤口愈合，软骨细胞基因的过度表达会加深对骨关节炎机理的理解。总之，Nucleofector? 转染技术大大促进了皮肤很软骨细胞治疗操作的进展，在将来的基因治疗中充满前景。Amaxa公司现在可以提供一下转染试剂盒：Human Dermal Fibroblasts（转染率70％）、NHEMs。肿瘤研究恶性癌变是基因紊乱导致的不可调控的细胞无限生长。Nucleofector? 质粒转染法主要针对正常的原代细胞和其他恶性细胞系等，因此，它可以用于肿瘤分析中基因突变的分析。并且和其他方法相比，转染基因的表达仅在2-4小时就能检测到（如，肝细胞瘤细胞系HepG2的转