动物遗传学实验室指南.docVIP

动 物 遗 传 学 实 验 指 导 动物遗传育种教研组 2006年5月 实 验 室 守 则 一、必须以严肃认真的科学态度从事各项实验，不得高声喧哗，更不得嘻笑打闹。 二、必须严格执行操作程序和按规定的步骤进行各项实验，不得随意取舍、变动。 三、必须按正规要求锻炼基本功，不断培养和提高实验室的动手能力，不得以任何借口拒绝教师的正确指导。 四、必须爱护仪器，节约原材料，保持试剂的纯净度，遇到损坏情况发生，要报告指导教师，如损坏仪器设备，除口头报告外，还应根据情况折价赔偿。 五、课前必须认真预习有关实习内容，课后要认真分析实验结果，按时交出实验报告。 六、进入实验室后，各组学生按规定位置入座，清点好每次所分 配的仪器、用品、试剂，用完后须洗净(不能洗涤者例外)如数归还原处，如有短缺情况，应由该组同学共同负责。 2006年5月 动物遗传学实验课考核制度 一、总则：实验课考核成绩占该门课程总成绩的30％，若实验课考核成绩达不到60分，则不能参加该门课程的期终考试。 二、考核内容及成绩计分方法： 1.平时作业、测验、课堂表现考核(40分) ①平时作业：实验报告应独立、按时完成，缺交一次扣10分，抄袭他人作业者及被抄者一律记0分。 ②平时测验：实验操作或回答提问抽查不符要求，每次扣10分。 ③考勤：迟到或早退每次扣5分，旷课一次扣10分并交学工组老师处理。 ④课堂纪律：参照实验室守则，违反纪律每次扣10分并交学工组老师处理。 ⑤卫生：课堂乱涂画者，每次扣10分并清除之；课后卫生不符要求擅自离去者，每人每次扣10分。 2.期终考核(60分)：采取抽签、口试形式，考核内容包括： ①实验内容有关问题。 ②实验操作。 动物遗传育种教研室 2006年5月 目 录 实验一 果蝇的饲养和观察……………………………………………………………………(1) 实验二 单因子试验(3：1分离试验)…………………………………………………………(4) 实验三 两对因子的自由组合…………………………………………………………………(6) 实验四 伴性遗传………………………………………………………………………………(6) 实验五 三点测交(基因定位)…………………………………………………………………(7) 实验六 粗糙链孢霉的分离与培养……………………………………………………………(9) 实验七 果蝇唾腺染色体的观察和制片……………………………………………………(11) 实验八 骨髓细胞染色体涂片法…………………………………………………………(13) 实验九 外周血淋巴细胞培养和染色体标本制备……………………………………(15) 实验十 染色体—显带标本的制备与识别……………………………………………(17) 实验十一 人群中P、T、C味盲基因频率的分析…………………………………………(18) 实验十二 遗传力和重复率的估算…………………………………………………………(20) 实验十三 遗传相关的估算……………………………………………………………(23) 实验十四 动物组织中总DNA的提取与纯度鉴定………………………………………………（26） 实验十五 PCR扩增………………………………………………………………………………（27） 实验一 果蝇的饲养和观察 一、实验目的 了解实验材料果蝇，学会果蝇的饲料制备、果蝇的性别和突变性状鉴别，为以后实验打下基础。 二、经典的遗传实验材料——果蝇 果蝇(fruit fly)，属于节肢动物门有气管亚门昆虫纲双翅目果蝇属，果蝇属共有900多个品种，通常用作遗传实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。 (一)生活史： 图1 果蝇的生活史1. 果蝇的生活周期。 图1 果蝇的生活史 卵→幼虫→蛹→成虫→卵 2. 生活周期长短与温度的关系（见表1-1）：一般温度在30℃以上能使果蝇不育或死亡，低温能使果蝇生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度20～25℃ 表1-1 生活周期长短与饲养温度的关系 温度 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 卵→幼虫 8天 5天 幼虫→成虫 57天 18天 6天 4天 3. 果蝇的繁育 只要温度适宜又有充足的食物，果蝇就能进行正常繁育，果蝇以酵母菌为食，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。常用的有玉米饲料、香蕉饲料、米粉饲料三种(见表l—2)，果蝇一般在恒温箱内培养，野生型果蝇生活力很强，突变型生活力较弱，在培养中要防止霉菌污染，须精心管理才行。