冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制.pdfVIP

· 10l6 · JournalofTr0DicalMedicineVo1．8No．10Oct．2008 文【章编号】1672—3619(2008)10—1016—04 · 基 础 研 究 论 著 · 冬凌草甲素对急性白血病HL一60细胞的增殖抑制作用 及其作用机制 刘加军 ，林东军 ，陆敏强 ，张俊峰 ，陈规划 (1．中山大学附属第三医院血液内科 ，广州 510630； 2．中山大学附属第三医院肝移植科，广州 510630) 摘【要】 目的 探讨冬凌草甲素对急性 白血病HL一60细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法 以不同 浓度的冬凌草 甲素作用于体外培养的HL一60细胞 ，MTr法检测细胞生长抑制率 ，应用流式细胞仪检测细胞凋亡 情况，瑞氏染色法观察细胞凋亡时的形态学变化。应用 PCR．ELISA及 RT—PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性 及端粒酶hTERTmRNA表达水平的变化。结果 冬凌草甲素可显著的抑制HL。60细胞的生长，诱导细胞发生凋 亡，并呈现出明显的量一效与时一效关系。冬凌草甲素作用4860h后在瑞氏染色图片上可见核浓缩及核碎裂等 典型的细胞凋亡特征，同时端粒酶hTERTmRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低。结论 冬凌草甲素能抑 制HL一60细胞的生长及诱导细胞发生凋亡：降低端粒酶hTERTmRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要 作用机制之～ 【关键词】 冬凌草甲素；白血病；端粒酶；细胞凋亡 中图分类号：R733．71 文献标识码：A AntiproliferationEffectsofOridoninonLeukemicHL-60CellsandItsMechanism LIUJia-ju．，LINDong—inn，LUMin—qiang，ZHANGJun—feng，CHENGui—hua (DepartmentofHematology，theThirdAffiliatedHospitalofSunYat—senUniversity， Guangzhou510630，China) A【bstract】 Objective ToinvestigatetheantiproliferationeffectoforidoninonleukemicHL一60cellsandit mechanism ．M eth0d HL．60 cells in culture medium were treated with differentconcentrationsoforidonin．The inhibitoryrateofthecellswasmeasuredbyMTrassay．Cellapoptoticratewasdetectedbyflowcytometry (FCM)． MorphologyofcellapoptosiswasobservedbyWrightSstain． Reversetranscriptasepolymerasechainreaction (RT— PCR) andPCR—enzyme—linkedimmunosorbentassay (ELISA) wereusedtodetecthTERTmRNAexpressionand telomeraseactivity beforeand afterapoptosis．Result Oridonin could inhibitthegrowth ofHL一60 cellsand cause apoptosissignificantly．Thesuppressionwasinbothtime—dependentanddose·dependentmanner．Markedmoprhological