表皮生长因子受体参与屋尘螨诱导的气道上皮屏障破坏的机制.PDFVIP

J South Med Univ, 2017, 37(6): 737-743 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2017.06.04 ·737 · 基础研究 表皮生长因子表皮生长因子受体参与屋尘螨诱导的气道上皮屏障破坏的机制受体参与屋尘螨诱导的气道上皮屏障破坏的机制 乐艳青，董航明，王燕红，赵海金，蔡绍曦 南方医科大学南方医院呼吸与危重症医学科，慢性气道疾病实验室，广东 广州 510515 摘要：目的探讨屋尘螨（HDM）对肌动蛋白应力纤维（F-actin）重新排布的影响及表皮生长因子受体（EGFR）相关信号通路在其 中的作用。方法 选取正常人支气管上皮细胞系16HBE 细胞为研究对象，以HDM 刺激细胞，予EGFR 抑制剂AG- 1478进行预 处理，实验分为4 组：Control 组，AG- 1478组，HDM 组，AG- 1478+HDM 组，应用Western blotting 检测HDM 对磷酸化（p- ）EGFR、 F-actin 及粘附连接蛋白E-cadherin 和β-catenin 表达的影响，应用免疫荧光技术观察F-actin、E-cadherin 及β-catenin 的分布变化， 并测量16HBE 细胞层的跨上皮电阻（TER）值和右旋糖苷（FITC-DX）的透过率。结果 HDM 刺激细胞10 min 时，p-EGFR 表达 明显增多（P0.05），E-cadherin （P0.05）及β-catenin （P0.05）蛋白表达无明显改变，免疫荧光示HDM 刺激后E-cadherin 及 β-catenin 均发生分布异常，由胞膜向胞浆弥散。HDM 组TER值（70.00±4.33）%显著下降，FITC-DX 透过率（115.98±4.34）%明显 增加，加入EGFR 抑制剂后E-cadherin 和β-catenin 的分布异常及TER值（90.00±3.75）%、FITC-DX（101.10±2.10）%透过率均明显 改善。HDM 刺激后促进F-actin 表达增多并出现重新排布，而EGFR 抑制剂可明显抑制这一过程（P0.05）。结论 表皮生长因 子受体相关信号通路参与了屋尘螨介导肌动蛋白应力纤维的重新排布，并导致气道上皮屏障破坏。 关键词：表皮生长因子受体；肌动蛋白应力纤维；屋尘螨；气道上皮；屏障破坏 Role of epidermal growth factor receptor in house dust mite-induced airway epithelial barrier dysfunction LE Yanqing, DONG Hangming, WANG Yanhong, ZHAO Haijin, CAI Shaoxi Laboratory of Chronic Airway Diseases, Department of Respiratory and Critical Care Medicine, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To investigate the role of epidermal growth factor receptor (EGFR) signaling pathway in bronchial epithelial actin stress fiber (F-actin) rearrangement induced by house dust mite (HDM). Methods Normal human bronchial epithelial cells (16HBE) were stimulated with HDM with or without pretreatment with AG-1478, an EGFR inhibitor. The levels of phospho(p)-EGFR, F-actin, E-cadherin and β-catenin in the cell cultures were detected with Western blotting. The localizations of F-act