昆虫杆状病毒表达系统表达人载脂蛋白A-!.PDF

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( *# 年 月 $%% !! !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +(,-./-0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 昆虫杆状病毒表达系统表达人载脂蛋白! ! 朱媛娥 徐慧斌 赵志安 钟 江 （复旦大学生命科学学院微生物学和微生物工程系，上海 $%%9 ） 摘 要 载脂蛋白;H(I1 是高密度脂蛋白中最主要的蛋白，在胆固醇代谢及动脉粥样硬化等疾病的发生和控制 ! 中有重要作用。为了建立大量生产和制备该蛋白的方法，昆虫杆状病毒表达系统被用来高效表达了两种形式的人 ;H(I1 。不带有信号肽序列的H0(;H(I1 蛋白表达后主要在细胞内，但在感染的晚期也有相当量的重组蛋白进入 ! ! 细胞培养液中。用蛇磷脂酶I$ 抑制因子 亚基信号肽序列引导表达的;H(I1 蛋白在感染早期可以被分泌到培 ! 养液中。在此基础上，通过JA-BK) L-HA;0(M- 疏水柱层析，从感染细胞的培养液中初步分离纯化了成熟的;H(I1 蛋 ! 白。这一结果为;H(I1 的进一步研究和应用奠定了基础。 ! 关键词 载脂蛋白，高密度脂蛋白，杆状病毒，疏水层析 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） N43# I !%%%1%#! $%% %#1%#$1%# 高密度脂蛋白（ ， ）是 端还带有 个氨基酸的 序列。在血浆里， 序 OCA16-BMPK )H(H0(P-B OQR # H0( H0( 血浆中的一类重要的脂蛋白，它参与胆固醇逆向转 列被某种未知的金属蛋白酶切除，最终形成含$9 ［，］ ［ ］ 运（ ， ），将肝外细胞和 个氨基酸的成熟 $ 3 。 !$ 发现 S-,-0M- GA()-MP-0() P0;BMH(0P ST8 ;H(I1 ! R(FM %/ +, H0( 组织中多余的胆固醇转运至肝脏，并加以转化和清 序列并非胞内加工所必须，去除 序列并不影响 H0( ［ ］ 除，因而具有抗动脉粥样硬化作用! U 9 。载脂蛋白 信号肽的正确切割，但是会减缓 ;H(I1 !分泌的速 （ ， ）是 中最主要 率。也有研究提出虽然 也具有构成 I1 ! IH()H(H0(P-B I1 ! ;H(I1 !