偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗体的研究.pdfVIP

偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗体的研究.pdf

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偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗体的研究.pdf

维普资讯 Vol_l2 分析科 学学报 No.2 J996 偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血 、 } 清乙型肝炎 E抗体的研究 燕 量 . 张书 露 捌澄凡 - _ _ ●_ 一 - ● ■ ■ ●- ● (青岛化a-学院应化系.青岛.266042) 摘蔓 本文提出用竞争性抑制儡奢反应使安酶联免疫分析法洲定人血清乙型肝支杰抗 体 (HBeAb).方法基干酶标 I.IBO,b-葺根过氧化抽酶 (HRP)催化 HtOz氧化郇联 甲苯胺 (oT 的反应1与却联 甲苯胺氧化产轴喜电枉上的还原反应相儡夸.潮定标记在HBeAb上 HRP量 .议术得抑制免疫反应的乙型肝更 E抗体含量 .本法潮定酶标 HBaAb-HRP及 I-lBeAb的曼敏度均高干燕典的EL璐A光度法 .方法用干病人血清样品分析 ,与l.巧A光 度法对照 ,其相关性糠甘 . 关键调兰主鸯 笔墨鎏墨益兰氅.墨芝:苎 三=竺!墨三楚生 邮联甲苯胺 乙型肝炎 E抗体是乙型肝炎诊断的一项重要指标 .测定乙型肝炎 E抗体有间接血 凝 、琼脂双扩散 、对沉免疫电泳、补体结合、ELISA光度法及放射免疫分析等 .这些方法 中,前几种的灵敬度不高 “:,放射免疫分析法灵敏度虽优于前几种方法,但又存在放射性 污染、实验费用高等问题n.电化学免疫分析法是将免疫技术与电化学检测相结合的一 种免疫分析新方法 ‘.已报道的方法灵敏度 比ELISA光度法高一个数量级 以上 ‘.本文 提出一种偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗体的新方法 .此法将 I王B Ab·HRP催化 HzOz氧化郐联甲苯胺反应与铝联早苯胺氧化产物在 电极上的还原反应相 偶合 ,在BR缓冲溶液中,在一O.58V(SCE)左右产生一灵敏的极谱波.根据测定标记在乙 型肝炎E抗体上的HRP的量 ,求得发生竞争性抑制免疫反应的乙型肝炎E抗体含量 .其 原理如下t 免疫反应 ; 一 o Aboo 旦rAb IAS.ASJAb AbAb O 旦_Aboo . -- - — AbAD ’ Ab AB IA w mhAb W 邸b and Ab ~ 卫Ab。o !。 旦 Ab IAS AbAb_———— A ddo 旦 Ab。o 鱼 Ab ^B ’Ab — AbA 一 AbAb 旦 Ab。o 卫 Ab IAg ·车立系国家 自然科学基金费曲课置 - 通讯嵌蕞人 收稿甘期 li~95-04-03 107 维普资讯 9-Ab :札 : I Ab Ag Ab*

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