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Pathogenic coccus与测验
二、链球菌属(一)概念链球菌属为触酶阴性,兼性厌氧,呈圆形或卵圆形的革兰阳性球菌,在液体培养基中生长时易形成长链而表现为沉淀生长(但肺炎链球菌为混浊生长)。(二)生物学特性1.形态与染色:革兰染色阳性。菌体呈圆形,直径为0.8~1.0μm,呈链状排列,在液体培养基中易成长链。在脓汁标本中为短链,成双或单个散在。无鞭毛、无芽胞、某些菌株在血清肉汤中可有荚膜。2.培养特性:本属细菌大多为需氧或兼性厌氧菌,少数微需氧及专性厌氧。营养要求较高,在含有腹水的培养基上生长良好。最适温度为35℃~37℃,最适pH为7.4~7.6,在5%C02环境下生长更好。在血琼脂平板上,经35℃ 18~24h培养后可形成灰白色、圆形、凸起、直径为0.1~0.75mm细小菌落,菌落周围出现不同溶血环。3.生化反应:本属细菌触酶试验阴性(与葡萄球菌属鉴别)
4.分类(1)根据溶血能力分类:利用链球菌在血平板上溶血情况分为三类,1)甲型(α)溶血性链球菌:又称草绿色链球菌。本菌为条件致病菌。2)乙型(β)溶血性链球菌:通称溶血性链球菌,透明溶血环。该型细菌致病性最强,常引起人和动物多种疾病。3)丙型(γ)链球菌:无溶血环。一般无致病性。(2)根据链球菌细胞壁抗原(即C抗原)分类:即常用Lancefield血清分型法,将链球菌分为A、B、C、D……T等18个群(其中I和J缺),对人类有致病性的90%属A群,B、C、D、G群链球菌感染较少见。5.对理化因素的抵抗力:不强。(三)致病性A群链球菌:
草绿色链球菌:属条件致病菌,常与亚急性心内膜炎相关。B群链球菌:是新生儿肺炎、脑膜炎和败血症的病原体。D群链球菌:引起呼吸道和泌尿道感染。治疗原则:A群链球菌感染,青霉素G被列为首选。B群链球菌常采用青霉素G和一种氨基糖苷类合用。(四)微生物学检验方法与原理1.标本采集:不同疾病采集不同标本。2.检验方法及鉴定(1)直接镜检:革兰染色,镜检。如符合链球菌的形态特征可初报。(2)直接检测抗原。(3)分离培养:血液标本,以无菌操作取两份血液各8~10ml,分别注入肉汤培养基,分别置需氧和厌氧环境中增菌,有细菌生长,然后分别接种于两个血平板,置需氧和厌氧环境中培养。脓汁和咽拭标本接种血平板并涂片染色镜检,若形态酷似链球菌,并革兰阳性,可初报。上述的培养物经35℃18~24h培养后,观察菌落特征和溶血情况。链球菌的菌落通常较小,透明或半透明,似针尖大小、凸起,菌落周围可出现α-溶血或β-溶血,也可不出现溶血。然后取可疑菌落经涂片、染色镜检证实。甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌可产生α-溶血,它们的菌落形态非常相似,应予以区别。猪链球菌在羊血平板上为α溶血,在兔血平板上呈β溶血。(4)鉴定:见生化反应。
三、肺炎链球菌(一)概念肺炎链球菌属链球菌科,链球菌属。(二)生物学特性1.形态与染色:革兰阳性,呈矛头状,成双排列,球菌。有荚膜(在人或动物体内易形成),无鞭毛,无芽胞。2.培养特性:需氧或兼性厌氧。最适的温度为35℃~37℃,最适的pH7.6~8.0。营养要求较高。在血琼脂平板上可形成脐状菌落,周围有草绿色溶血圈。在液体培养基中培养时间过长,可因产生自溶,培养液可变澄清,管底沉淀。3.生化反应:菊糖、胆汁溶解试验阳性、0ptochin敏感试验阳性。(与草绿色链球菌的鉴别。)(三)致病性致病物质:荚膜。所致疾病主要有大叶性肺炎、支气管炎。(四)微生物学检验方法与原理1.标本采集2.试验方法及鉴定(1)直接涂片检查:经革兰染色,镜检见革兰阳性矛尖状双球菌。(2)分离培养:血液、脑脊液需增菌培养,经葡萄糖硫酸镁肉汤增菌后,肺炎链球菌可呈均匀混浊,而且有绿色荧光。无须增菌培养的脓汁或脑脊液沉渣接种于血琼脂,置5%~10%C02环境中,经35℃ 18~24h培养后观察茵落,并取可疑菌落作进一步鉴定。(3)鉴定试验1)胆汁溶解试验:阳性。2)菊糖发酵试验:阳性。3)动物试验:小白鼠对肺炎链球菌极为敏感。4)荚膜肿胀试验:阳性。5)0ptochin敏感试验:阳性。6)快速乳胶凝集试验阳性。
四、肠球菌属(一)概念肠球菌属是肠道的正常栖居菌。(二)生物学形状为革兰阳性,成双或短链状排列的卵圆形球菌,无芽胞,无荚膜,部分肠球菌有稀疏鞭毛。营养要求高,需氧及兼性厌氧,在胆汁七叶苷和含6.5%NaCl培养基中可以生长(此点可与链球菌鉴别)。在血平板上主要表现为γ-和α-溶血。触酶阴性,多数肠球菌能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺(PYR)。与同科链球菌的显著区别在于肠球菌能在高盐(6.5%NaCl)、高碱(pH9.6)、40%胆汁培养基上和10℃~45℃环境下生长,并对许多抗菌药物表现为固有耐药。
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