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分析超离应用介绍(pdf)
分析型超速离心
AUC 实验原理
SV (sedimentation velocity,沉降速率)
超速离心将样品沉至样品池底部,在此过程中扫描样品分
布状态,通过分析其随时间的变化过程,获得不同组分的
沉降性质。
SE (sedimentation equilibration,沉降平衡)
通过适中的转速,产生与样品分子扩散相平衡的离心力,
最终使处于平衡状态相对静止的样品呈一定的浓度分布,
通过对该分布曲线拟合计算得到样品平均分子量。
SV (sedimentation velocity,沉降速率)
SE (sedimentation equilibration,沉降平衡)
SEDNTERP (/)
AUC光学检测系统
Abs (Absorbance optics, 紫外-可见吸收)
190-800nm波长范围选择性吸收, 检测浓度0.5-1.5 A, 噪音
小, 石英或蓝宝石窗口,样品纯度要求严格 (>95 %)
IF (Interference optics ,激光干涉)
非选择性检测, 检测浓度 0.1-40 mg/ml, 噪音明显, 蓝宝石
窗口,样品纯度要求严格 (>95 %)
Fluorescence detector ,荧光系统
特异性、灵敏度极好,488nm激发GFP检测505nm 荧光信
号,痕量检测,可检测未经纯化的体系
IF (Interference optics ,激光干涉)
非标记蛋白质相互作用定量检测系统
•等温热滴定(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)
•表面等离子共振(Surface plasmon resonance, SPR)
•分析型超速离心(Analytical Ultracentrifuge ,AUC)
•等温热滴定(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)
6.2
G = -RT ln KB 6.0
G = H –TS
5.8
Syringe c
e
s
/
l
a
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