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nanobret技术蛋白相互作用检测
活细胞内实时检测蛋白相互作用
NanoBRETTM : Innovative BRET Technology
新型生物发光共振能量转移
NanoBRETTM技术
● 一站式 ● 活细胞 ● BRET
NanoBRETTM 完整解决方案- 背景介绍
： ：
蛋白 蛋白相互作用检测与生物发光共振能量转移 (BRET, bioluminescence resonance energy transfer) 技术
—— ， 。
蛋白相互作用调控绝大部分的生物进程 从信号通路转导中短暂的相互作用到大的多种蛋白复合体组装 是现在研究的热点
， ， 。 ，
目前蛋白相互作用检测方法分为两类 一类是蛋白水平检测, 如Co-IP pull down 等 检测结果欠缺在细胞水平的验证而缺乏说服力
。
因此还需要进行细胞学检测来进行验证 而生物发光共振能量转移(BRET) 方法与荧光共振能量转移(FRET) 则是极为少数可以在
。 。
活细胞水平进行蛋白相互作用检测的方法 BRET 与蛋白水平检测结果可相互印证
FRET 原理：
，
当两个蛋白分子相互作用 一个蛋白标记的供体荧光基团的荧光发
，
射光光谱与另一个蛋白标记的受体荧光基团的激发光谱相重叠 供
， ，
体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光 随着距离延长 FRET
效应显著减弱。
BRET 原理：
，
当两个蛋白分子相互作用 一个蛋白融合表达的供体萤光素酶蛋白
( 传统使用Renilla 海肾萤光素酶) 酶学反应产生的发光信号光谱与另
，
一个蛋白标记的受体荧光基团的激发光谱相重叠 诱发受体分子发
出荧光。
BRET 方法的优点：
， 。 ， 。
无需激发光 背景更低 无需漂白 细胞损坏更少
避免了自发荧光干扰。 数据窗口更宽。
TM
NanoBRET 技术：
TM ® ® TM
，
NanoBRET 分析是大幅度改良的BRET 分析平台 使用NanoLuc luciferase 作为能量供体
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