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《运动生物化学》实验讲义 实验一 基本技能操作 【实验目的】 1. 了解实验室规则及注意事项 2. 掌握运动生化实验常用仪器的名称、使用以及清洗方法。 3. 掌握常用生化分析方法——分光光度法 4. 学习写实验报告 【实验步骤】 1.实验室规章制度 （1）课前应预习，有问题及时提出，准备充分后开始实验。 （2）严格按照操作规程进行实验，随时记录所观察到的现象及实验数据。课后进行整理、 分析，并写出实验报告。 （3）杜绝实验室内嬉戏打闹，大声喧哗。 （4）保持药品架及实验室的整洁，保证试剂药品的纯净。试剂用后立即盖好放回原处。 注意移液管不能混用，试剂瓶盖不能盖错。 （5）爱护仪器设备，注意安全操作，若有仪器损坏或意外事故发生应立即报告老师。 （6）实验完毕后，清洗所用器皿，整理好实验台面，搞好室内卫生。将废纸、废液等杂 物倒入污物桶，统一处理。 （7）实验完毕后检查关闭水源、电源，门窗等，经教师检查后，离开实验室。 2. 移液管的使用 （1）选择与所要量取溶液容量相近的移液管（移液管规格要稍大于或等于所要量取的 容量），观察移液管刻度数字的排布； （2）一手持吸耳球，一手持移液管。首先将移液管插入液面下约 1 厘米左右出，捏吸 耳球排出气体后堵住移液管上端口，缓慢放松吸耳球，观察液面上升情况。当液面上升超过 零刻度一定距离后，移去吸耳球，以持移液管手的食指指腹迅速按住移液管上端口（切记不 1 得使用拇指）。 （3）放下吸耳球，拿起试剂瓶，要求试剂瓶与台面约成45 度角，移液管头接触瓶壁并 垂直于台面，缓缓放松手指，使液面缓慢下降到预设点。注意不可使液面下降过快。移至另 一容器时，要求一手持容器容器于台面约成 45 度角，移液管头接触壁且垂直于台面，放松 食指，放出所要移取的溶液量。 （4）当要求将移液管的溶液全部放出时，应注意观察移液管是否要求吹。一般 1 毫升 （包括1 毫升）以下的移液管，应使用吸耳球将剩余的溶液吹入容器内，这样才是所需的全 部移液量。1 毫升以上的移液管全部放出其溶液时，不需要吹，只需移液管头靠壁，全部放 完后，停留约 15 秒钟，此时管头仍残留一部分溶液，称为死容量积，如果吹入，则超过所 要求的容量。 3. 玻璃器皿的洗涤和干燥 （ 1）凡能用毛刷刷洗的仪器（如试管、烧杯、锥形瓶、量简等），先用自来水洗刷再 用毛刷沾取洗衣粉或肥皂或去污粉）将仪器内、外部（特别是内壁）细心刷洗，用自来水冲 洗干净后，再用少量蒸馏水漱洗 2－3 次倒置于仪器架上自然晾干后备用。 （2）不能用毛刷刷洗的量器（如：容量瓶、移液管等），应先用自来水冲洗，沥干，再 用重铬酸钾清洁液浸泡 4－6 小时（或过夜），自清洁液中取出并沥干后，用自来水冲洗干净， 再用蒸馏水冲洗 2－3 次，倒置于量器架上自然干燥。 （3）新购量器表面常附有游离的碱性物质及污泥，可先用肥皂水洗刷再用自来水洗净， 然后浸泡在 1％－ 2％盐酸溶液中过夜（不少于 4 小时）后，再进一步洗涤，最后用 蒸馏水冲洗 2－3 次。 （4）凡沾有染料的器皿，先用清水初步洗净,再置重铬酸钾清洁液或稀盐酸中浸泡可以 除去；如果使用 3%盐酸乙醇洗涤效果更好。一般染料多呈碱性，故不宜用肥皂水或碱性洗 液。 （5）粘附有血浆的刻度吸管等，可先用 45%尿素浸泡使血浆蛋白溶解，然后用水冲洗 干净，如不能达到清洁要求，则可浸泡于重铬酸钾清洁液中 4~6 小时，再用水洗涤干净，也 可先用 1%氨水浸泡使血浆膜溶解，然后再依次用 1%稀盐酸和水及蒸馏水冲洗。 4. 721 型分光光度计的使用